[发明专利]一种广泛耐药摩氏摩根菌及其在新型抗菌药物筛选中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及微生物领域，尤其是涉及一种广泛耐药(extensivedrug resistant，EDR)摩氏摩根菌，以及该摩氏摩根菌在新型抗菌药物筛选中的应用。

背景技术

目前，由于抗菌药物的广泛使用，细菌对抗菌药物的耐药性日益严重，因此，迫切需要发现具有新结构和新作用机制的抗细菌化合物，以有效地治疗耐药菌引起的一系列疾病(Coates AR，Hu Y.Novelapproaches to developing new antibiotics for bacterialinfections.Br J Pharmacol，2007，152：1147-1154.；Davies J.Where have all the antibiotics gone？CanJ Infect Dis MedMicrobiol，2006，17：287-290.)。

通过以广泛耐药菌(对多种抗菌药物耐药的细菌)为模式生物构建细胞水平的药物筛选模型进行新药的筛选，既可以排除已知作用机制的化合物干扰，提高新药发现的效率，又可以避免单靶点的分子模型带来的漏筛，有可能由此发现尚未发现的全新靶点的抗菌药物。但是目前还没有合适的广泛耐药菌株可以用于药物筛选，因此，寻找广泛耐药的新型耐药菌株是新药筛选领域亟需解决的技术问题。

摩氏摩根菌属于革兰氏阴性杆菌，广泛分布于多种自然环境以及人和动物的肠道内。临床分离的摩氏摩根菌常具有对β-内酰胺类抗菌药物的天然的耐药性，例如对青霉素、氨苄西林、氨苄西林和苏巴坦组合剂、苯唑西林、第一和第二代头孢霉素、红霉素、多黏菌素E、多黏菌素B等常见抗菌药物天然耐药。而对哌拉西林、替卡西林、美洛西林、第三和第四代头孢霉素、碳青霉烯类、氨曲南、氟喹诺酮类、氨基糖苷类、氯霉素类抗菌药物敏感(James R Miller：MorganellaInfections [Online].Retrieved from http://emedicine.medscape.com/article/222443-treatment)。

本发明人进行了深入的研究，分别在培养基中加入青霉素、头孢吡肟、链霉素、环丙沙星、左氧氟沙星、交沙霉素、杆菌肽、粘菌素、利福平、磺胺甲恶唑等，以此作为耐药菌的耐药筛选指标，终于从养殖池塘水体和病死的鲍鱼体内菌群中筛选出了能够耐受上述药物的新型摩氏摩根菌。获得的广泛耐药摩氏摩根菌除具有上述的天然耐药性之外，对野生型应该敏感的氨基糖苷类、喹诺酮类和氯霉素类等抗菌药物耐药性也明显提高。从而为构建细胞水平的新型抗菌药物筛选模型提供了一个理想的广泛耐药菌，进而提供了新型的抗菌药物筛选模型。

发明内容

本发明的一个方面涉及一种摩氏摩根菌，其保藏编号为CGMCCNo.3655，保藏日期2010年3月10日，保藏单位是中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)。

本发明的另一方面涉及所述的摩氏摩根菌在新型抗菌药物筛选中的应用。

本发明的又一方面涉及一种筛选新型抗菌药物的方法，其特征在于，所述方法使用本发明的摩氏摩根菌。利用上述广泛耐药菌的摩式摩根菌作为模式生物，联合使用敏感型的摩式摩根菌，通过比较不同样品对二者抑菌活性的差异，发现具有新结构和新作用机制的抗广泛耐药菌的药物。

在本发明的一个实施方案中，所述方法包括初筛步骤和复筛步骤。

在本发明的一个实施方案中，所述初筛步骤为纸片法或96孔板法。

在本发明的一个实施方案中，所述新型抗菌药物来自微生物发酵液、植物提取液、或化合物。

本发明人以本发明的摩氏摩根菌作为筛选模型，对已知结构和作用机制的化合物进行筛选，评价模型对传统作用机制抗菌药物的抗干扰能力。同时利用耐药菌筛选化合物库，计算初筛模型的阳性率并与模型评价标准进行比较判断模型选择性及可靠性。其中，所述模型评价标准如下：

初筛标准：

1)多数与表1中MIC_R＞100μg/ml抗菌药物为同类的样品不能被筛选到；

2)与表1中MIC_R＜100μg/ml抗菌药物为同类的样品可以被筛选到；

3)作用机制不同于表1中列举抗菌药物的样品可以被筛选到。

复筛标准：

分别测定初筛阳性样品对耐药菌和敏感菌抑菌圈大小和MIC值。