[发明专利]超顺磁性氧化铁标记的人胰腺癌细胞株及标记方法与应用有效
申请号: | 201010138427.X | 申请日: | 2010-04-02 |
公开(公告)号: | CN101818128A | 公开(公告)日: | 2010-09-01 |
发明(设计)人: | 张小明;武超颖;蒲宇;邵阳 | 申请(专利权)人: | 川北医学院附属医院 |
主分类号: | C12N5/09 | 分类号: | C12N5/09;A01K67/027;C12Q1/02;A61K49/06;C12R1/91 |
代理公司: | 成都科海专利事务有限责任公司 51202 | 代理人: | 黄幼陵 |
地址: | 637000 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 顺磁性 氧化铁 标记 胰腺癌 细胞株 方法 应用 | ||
1.一种超顺磁性氧化铁标记的人胰腺癌细胞株,所述人胰腺癌细胞内含有超顺磁 性氧化铁,其特征在于标记方法如下:
(1)标记液的配制
以超顺磁性氧化铁纳米粒子、质量浓度0.1%多聚赖氨酸储备液、含新生牛血清的 1640培养液为原料,将所述原料在常压、室温下混合均匀即形成标记液,所述标记液中, 超顺磁性氧化铁纳米粒子与0.1%多聚赖氨酸储备液的体积比为3∶1,铁离子的浓度至 少为168μg/ml;
所述超顺磁性氧化铁纳米粒子是以Fe3O4和Fe2O3纳米结晶为磁性核心,外面包被 了碳氧葡聚糖的纳米粒子,粒径为45nm~60nm;
(2)人胰腺癌细胞株的培养
将细胞浓度0.5×106/ml~1×106/ml的人胰腺癌细胞悬液种植于培养瓶中,并加入 含新生牛血清的1640培养液,然后将所述培养瓶放入CO2孵箱中,于37℃进行培养, 当人胰腺癌细胞铺满培养瓶瓶底的80%后换液;
(3)人胰腺癌细胞株的标记
将步骤(1)配制的标记液加入步骤(2)培养获得的培养液中形成标记体系,所述 标记液的加入量以标记体系中铁离子的浓度达到21μg/ml~42μg/ml为限,将标记体系放入 CO2孵箱中,于37℃培养20小时~24小时,培养时间届满后将标记体系从CO2孵箱中取出, 依次进行弃培养液、用PBS液冲洗、用胰酶消化离心、用含新生牛血清的1640培养液重 悬的操作,即获得超顺磁性氧化铁标记的人胰腺癌细胞株。
2.权利要求1所述超顺磁性氧化铁标记的人胰腺癌细胞株在构建胰腺癌动物模型中 的应用。
3.权利要求1所述超顺磁性氧化铁标记的人胰腺癌细胞株在磁共振成像中的应用, 包括细胞水平的磁共振成像和动物模型的磁共振成像。
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