[发明专利]一种快速定量线虫存活率的方法及试剂盒

权利要求书

1.一种快速定量线虫存活率的方法，采用染料对线虫进行染色，由于活线虫着色，死线虫不着色，且光吸收值与活线虫的数量成正比，从而直接可反映线虫的存活率，其特征在于该方法应用的染料是红四氮唑（2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride，TTC），分子式为C₁₉H₁₅ClN₄。

2.根据权利要求1所述的一种快速定量线虫存活率的方法，其特征在于该方法中的线虫是自由生活的种类，或者是寄生生活的种类，优选秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans）。

3.根据权利要求1至2中任意一项所述的一种快速定量线虫存活率的方法，其特征在于该方法中的线虫是处于任一发育阶段的线虫，自由生活的线虫是选自一期幼体线虫至成虫的任一发育阶段线虫，寄生生活的是自由生活时期的幼体线虫。

4.根据权利要求1至3中任意一项所述的一种快速定量线虫存活率的方法，其特征在于染色温度为4℃～35℃、染料浓度为0.1%～20%、染色时间为5min～45min。

5.根据权利要求1至4中任意一项所述的一种快速定量线虫存活率的方法，其特征在于应用的线虫数量为15～1500条。

6.根据权利要求1至5任意一项所述的一种快速定量线虫存活率的方法，其特征在于该方法采用二甲基亚砜（DMSO）或甲醇将在线虫体内显色的染料溶出。

7.根据权利要求1至5任意一项所述的一种快速定量线虫存活率的方法，其特征在于染色后还可以采用甘油作为透明剂，然后采用酶标仪直接测定吸光值。

8.根据权利要求1至7任意一项所述的一种快速定量线虫存活率的方法，其特征在于该方法在新药筛选、农药筛选、环境评价及水质评价领域应用。

9.一种快速定量线虫存活率的试剂盒，其特征在于该试剂盒含有染料红四氮唑（2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride，TTC），分子式为C₁₉H₁₅ClN₄。

10.一种快速定量线虫存活率的试剂盒，其特征在于该试剂盒可以含有线虫，其中的线虫是自由生活的种类，或者是寄生生活的种类，优选秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans）。

11.根据权利要求9至10中任意一项所述的一种快速定量线虫存活率的试剂盒，其特征在于该试剂盒中的线虫是处于任一发育阶段的线虫，自由生活的线虫是选自一期幼体线虫至成虫的任一发育阶段线虫，寄生生活的是自由生活时期的幼体线虫。

12.根据权利要求9至11中任意一项所述的一种快速定量线虫存活率的试剂盒，其特征在于染色温度为4℃～35℃、染料浓度为0.1%～20%、染色时间为5min～45min。

13.根据权利要求9至12中任意一项所述的一种快速定量线虫存活率的试剂盒，其特征在于应用的线虫数量为15～1500条。

14.根据权利要求9至13任意一项所述的一种快速定量线虫存活率的试剂盒，其特征在于该试剂盒含有二甲基亚砜（DMSO）或甲醇。

15.根据权利要求9至14任意一项所述的一种快速定量线虫存活率的试剂盒，其特征在于该试剂盒含有甘油。

16.根据权利要求9至15任意一项所述的一种快速定量线虫存活率的试剂盒，其特征在于该试剂盒在新药筛选、农药筛选、环境评价及水质评价领域应用。