[发明专利]一种用于结核病预防的新型疫苗有效
| 申请号： | 201010140350.X | 申请日： | 2010-04-07 |
| 公开（公告）号： | CN101850111A | 公开（公告）日： | 2010-10-06 |
| 发明（设计）人： | 鲍朗;杨晓玲;邓仪昊 | 申请（专利权）人： | 四川大学 |
| 主分类号： | A61K39/04 | 分类号： | A61K39/04;A61K39/39;A61K48/00;A61P31/06;C12N15/31;C12N15/63 |
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| 地址： | 610041 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 结核病 预防 新型 疫苗 | ||
1.一种重组卡介苗rBCG：GMCSF-CFP10，其特征在于，能够稳定的表达GMCSF-CFP10嵌合蛋白。
2.如权利要求1所述的重组卡介苗，其特征在于，免疫原性强于传统卡介苗。
3.如权利要求1所述的重组卡介苗的制备方法，其特征在于，该方法包括以下几个步骤：
(1)hGM-CSF基因的扩增、结核分枝杆菌CFP10基因的扩增；
(2)GMCSF-CFP10嵌合基因的扩增；
(3)将GMCSF-CFP10嵌合基因插入至大肠杆菌-结核分枝杆菌穿梭质粒pMV361中，构建rpMV361GMCSF-CFP10；
(4)将(3)中的重组质粒电转化入卡介苗。
4.如权利要求1所述的重组卡介苗，其特征在于，通过抗生素筛选、提取基因组、PCR及诱导表达后进行Western-blot鉴定，得到rBCG：GMCSF-CFP10。
5.一种重组质粒，其特征在于，用基因工程技术将人粒-巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)序列和结核分枝杆菌CFP10基因序列嵌合后插入大肠杆菌-结核分枝杆菌穿梭质粒序列中。
6.如权利要求5所述的重组质粒，其特征在于，大肠杆菌-结核分枝杆菌穿梭质粒为pMV361。
7.如权利要求5所述的重组质粒，其特征在于，将人GM-CSF基因序列和结核分枝杆菌CFP10基因序列连接后插入大肠杆菌-结核分枝杆菌穿梭质粒的多克隆位点处。
8.如权利要求5所述的重组质粒，其特征在于，用PCR、酶切和测序鉴定，得到重组质粒rpMV361GMCSF-CFP10。
9.如权利要求1所述的重组卡介苗，其特征在于，将如权利要求5所述的重组质粒电转化入卡介苗，得到rBCG：GMCSF-CFP 10。
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