[发明专利]蚯蚓在制备趋化性细胞因子诱导剂方面的应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体涉及蚯蚓在制备趋化性细胞细胞因子诱导剂方面的应用。

背景技术

中国民间有许多疗效显著的验方等待着人们去研究考察，如民间经常使用蚯蚓治疗各种烫伤，方法如下：挖适量蚯蚓，洗净后置于容器内，再将少许白糖洒在蚯蚓身上，蚯蚓遇见白糖，便融化成殷红色液体，再将此液体涂于烫伤处，几分钟后，被烫伤部位的火辣辣的刺痛感就会消失，而烫伤部位的表面呈白色并带有明显的白糖颗粒状，但感觉冰凉舒适。每天涂数次，一星期后，基本能痊愈且不留疤痕。该方经过长期使用，疗效明显。

蚯蚓，药名地龙，在中药领域已经有四千多年的利用史，具有清热息风、活血通络、消肿止痛的功效。长期使用证明蚯蚓提取物对人体皮肤烧烫伤的部位能够起到散热、止痛、消肿、解毒、生肌的作用，治疗烫伤迅速而不留疤痕。

随着科学技术的发展，国内外研究人员对蚯蚓的药理作用和临床效果不断有新的进展。如张凤春等在新西兰大白兔背部制作伤口模型，考察地龙提取液对伤口愈合的影响，结果表明：实验组伤口的肉芽组织中含有更多的肌纤维母细胞，其内有较多的肌动蛋白、肌微丝和致密斑，伤口收缩明显，修复较快，与对照组比较有显著性差异。由此得出结论：地龙可促进肉芽组织中肌纤维母细胞增生，有利于伤口的收缩，对伤口的愈合有促进作用。

趋化性细胞因子对白细胞的趋化作用是炎症发生过程中的重要起始步骤，也是机体防御和清除入侵病原体等异物先天性免疫功能的一个重要方面。受激活调节正常T细胞表达和分泌因子(regulated uponactivation normal T cell expressed and secreted factor，RANTES)，是趋化性细胞因子cc家族的重要代表之一(CCL5)。RANTES来源广泛，可由CD8+T细胞、上皮细胞、成纤维细胞和血小板等细胞表达和分泌，在免疫调节、炎症、抗感染、自身免疫疾病等方面均有重要意义。它有多种生物学功能：①对多种白细胞有趋化作用，可以募集特定的白细胞到达炎症区域，执行各自的功能，这种作用对防御感染和创伤修复非常有利。②RANTES可提高抗原特异性的抗体应答，诱导特异性抗体的产生。③RANTES还可调节细胞的生长和分化。

细胞因子检测是判断机体功能的一个重要指标，在疾病的诊断、疗效判断及监测方面有重要意义，研究细胞因子也有助于阐明分子水平的调节机制。生物芯片具有灵敏度高、特异性好、重复性佳、准确性高、样品用量少的优点，可以快速而准确地检测样本中多种生长因子的表达情况，从而确定待测样本中有关因子的表达变化。

发明内容

本发明旨在提供。

具体为，将蚯蚓用于制备趋化性细胞细胞因子诱导剂。优选的，趋化性细胞细胞因子为受激活调节正常T细胞表达和分泌因子。

蚯蚓包括鲜蚯蚓、蚯蚓分泌物和蚯蚓经白糖处理的产物。

趋化因子的主要作用是趋化吸引各白细胞亚群向创面转移聚集。但在上皮再生和血管形成及组织重塑等过程中也起到了非常重要的作用。趋化因子可通过干预组织重塑而减少瘢痕的形成，提高预后质量。

目前，炎性细胞在创面愈合中的作用已得到公认。烧(创)伤发生后，趋化因子将各种炎性细胞招引到创面局部，发挥清创(吞噬变性坏死组织或衰老组织及微生物)和调节上皮再生、新生血管形成、细胞外基质生成的作用，并参与组织重塑等。

一方面，RANTES不仅可以诱导激活T细胞，还可作用于单核细胞和中性粒细胞在创面愈合中发挥作用。单核细胞在正常创面愈合过程中具有非常重要的作用，不仅有抗原呈递和吞噬功能，还是生长因子的重要来源。中性粒细胞可清除创面异物、入侵病原体、坏死组织等。

另一方面，内皮细胞在创面愈合过程中发挥了很大的作用。在接受一定的刺激后，可表达多种趋化因子，其中就包括CC类中的RANTES。RANTES可以促进损伤血管内皮的修复，从而加快创面愈合。

本发明利用现代分子生物学技术，借助人血管生长因子抗体芯片，检测蚯蚓分泌物中多种生长因子的表达情况。研究发现蚯蚓白糖组、蚯蚓分泌物组和单独蚯蚓组均可以诱导RANTES的表达，探寻到同蚯蚓治疗烫伤相关的生长因子，为阐明蚯蚓治疗烫伤作用机制提供思路，在分子水平上阐明蚯蚓治疗烫伤的作用机制，也为蚯蚓治疗烫伤及伤口愈合等应用提供实验依据，为利用现代技术对中医药民间验方进一步研究开发提供新的思路。

附图说明

图1为实施例1中，蚯蚓白糖组、蚯蚓分泌物组和单独蚯蚓组的人血管生长因子抗体芯片实验的检测结果

具体实施方式

药品与试剂