[发明专利]一种包含HLZ乳腺特异性表达载体的牛胎儿成纤维细胞有效
| 申请号： | 201010143538.X | 申请日： | 2010-04-09 |
| 公开（公告）号： | CN101892263A | 公开（公告）日： | 2010-11-24 |
| 发明（设计）人： | 武志强;张涌;孙达权 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学;杨凌科元克隆股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N5/10;C12N15/877;C12R1/91 |
| 代理公司： | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人： | 陆万寿 |
| 地址： | 712100 陕*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 包含 hlz 乳腺 特异性 表达 载体 胎儿 纤维 细胞 | ||
1.一种HLZ乳腺特异性表达载体，包含目的基因HLZ，其特征在于，分别在HLZ基因的5′端插入如SEQ.ID.NO.2所示的CSN5序列，3′端插入如SEQ.ID.NO.3所示的CSN3序列，作为调控元件。
2.如权利要求1所述的HLZ乳腺特异性表达载体，其特征在于，所述HLZ乳腺特异性表达载体在HLZ基因与CSN3序列之间还包含抗生素正筛选基因和标记基因，在CSN5序列的上游和CSN3序列的下游还包含相同的抗生素负筛选基因。
3.如权利要求2所述的HLZ乳腺特异性表达载体，其特征在于，所述的抗生素正筛选基因为neo基因，所述的标记基因为IRES-EGFP基因，所述的抗生素负筛选基因为TK基因。
4.如权利要求1所述的HLZ乳腺特异性表达载体，其特征在于，所述HLZ乳腺特异性表达载体为pCSN2-HLZ-Neo-TK表达载体。
5.一种包含目的基因HLZ的牛胎儿成纤维细胞，其特征在于，宿主细胞为牛胎儿成纤维细胞，通过转染外源性表达载体pCSN2-HLZ-Neo-TK，将目的基因HLZ整合到牛胎儿成纤维细胞的基因组。
6.如权利要求5所述的包含目的基因HLZ的牛胎儿成纤维细胞，其特征在于，所述的宿主细胞为1～3代的牛胎儿成纤维细胞。
7.如权利要求5所述的包含目的基因HLZ的牛胎儿成纤维细胞，其特征在于，牛胎儿成纤维细胞通过电穿孔法转染外源性表达载体pCSN2-HLZ-Neo-TK。
8.如权利要求5所述的包含目的基因HLZ的牛胎儿成纤维细胞，其特征在于，所述包含目的基因HLZ的牛胎儿成纤维细胞为荷斯坦奶牛胎儿成纤维细胞-pCSN2-HLZ，该细胞保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC C201003。
9.权利要求5所述的包含目的基因HLZ的牛胎儿成纤维细胞作为核移植构建转基因克隆胚的核供体细胞的应用。
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