[发明专利]一种无需借助PCR的基因检测方法

权利要求书

1.一种基因检测方法，包含如下步骤：利用修饰有识别分子和编码分子的纳米粒子为纳米探针及修饰有捕获分子的磁性微球为捕获探针与靶基因形成夹心式复合物，分离出该夹心式复合物，释放出纳米探针，通过质谱直接检测纳米探针表面编码分子的分子离子峰，其特征在于：纳米探针中编码分子与识别分子的比例为300～2000∶1，优选1300～2000∶1。

2.根据权利要求1所述的基因检测方法，其特征在于所述的形成夹心式复合物的杂交反应体系的盐离子浓度为0.2～1.0M，优选0.5～0.7M。

3.根据权利要求1所述的基因检测方法，其特征在于所述的质谱为基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱或电喷雾质谱，优选基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱。

4.根据权利要求3所述的基因检测方法，其特征在于所述的基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱所用的基质为α-氰基-4-羟基肉桂酸，3，5-二乙氧基-4-羟基肉桂酸，芥子酸，2，5-二羟基苯甲酸或DNA自主装的金纳米颗粒中的任一种。

5.根据权利要求4所述的基因检测方法，其特征在于所述的基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱所用的基质为DNA自主装的金纳米颗粒，优选以10～20个胸腺嘧啶或者腺嘌呤组成的DNA自组装的胶体金纳米颗粒。

6.根据权利要求所述的基因检测方法，其特征在于所述的基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱采用正离子反射模式，在10％～70％的激光强度下进行检测。

7.根据权利要求1所述的基因检测方法，其特征在于所述的纳米粒子为胶体金纳米粒子，其粒径为1～100nm。

8.根据权利要求1所述的基因检测方法，其特征在于所述的编码分子是分子中含有巯基或者二硫键的有机化合物，优选硫醇、硫醚或二硫化物。

9.根据权利要求1所述的基因检测方法，其特征在于所述的磁性微球可以是无机微球、生物高分子微球或聚合物高分子微球，优选聚苯乙烯磁性微球。

10.根据权利要求1或9所述的基因检测方法，其特征在于所述的磁性微球表面修饰有氨基或链霉亲和素。