[发明专利]一种革兰染色二步法自动染色仪

说明书

技术领域

本发明涉及一种自动染色仪，尤其是涉及一种革兰染色二步法自动染色仪。

背景技术

革兰染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884年由丹麦医师Gram创立。细菌先经碱性染料结晶染色，而经碘液媒染后，用酒精脱色，在一定条件下有的细菌此色不被脱去，有的可被脱去，因此可把细菌分为两大类，前者叫做革兰氏阳性菌(G+)，后者为革兰氏阴性菌(G-)。为观察方便，脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红等进行复染。阳性菌仍带紫色，阴性菌则被染上红色。有芽孢的杆菌和绝大多数球菌，以及所有的防线菌和真菌都呈革兰氏正反应；弧菌，螺旋体和大多数致病性的无芽孢杆菌都呈现负反应。

革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在化学组成和生理性质上有很多差别，染色反应不一样。现在一般认为革兰氏阳性菌体内含有特殊的核蛋白质镁盐与多糖的复合物，它与碘和结晶紫的复合物结合很牢，不易脱色，阴性菌复合物结合程度低，吸附染料差，易脱色，这是染色反应的主要依据。另外，阳性菌菌体等电点较阴性菌为低，在相同PH条件下进行染色，阳性菌吸附碱性染料很多，因此不易脱去，阴性菌则相反。所以染色时的条件要严格控制。例如，在强碱的条件下进行染色，两类菌吸附碱性染料都多，都可呈正反应；PH很低时，则可都呈负反应。此外，两类菌的细胞壁等对结晶紫—碘复合物的通透性也不一致，阳性菌透性小，故不易被脱色，阴性菌透性大，易脱色。所以脱色时间。脱色方法也应严格控制。

革兰氏染色原理：

G+菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。

G-菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高，乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，沙黄复染后呈红色。

革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：

1)涂片固定。

2)草酸铵结晶紫染1分钟。

3)自来水冲洗。

4)加碘液覆盖涂面染1分钟。

5)水洗，用吸水纸吸去水分。

6)加95％酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，30秒后水洗，吸去水分。

7)蕃红染色液(稀)(或沙黄)染10秒钟后，自来水冲洗。干燥，镜检。

染色的结果，革兰氏正反应菌体都呈紫色，负反应菌体都呈红色。

革兰染色4步染色效果很好，但操作比较复杂，现代实验室工作繁忙，对各项技术方法有力求简便的要求，以便在有限的时间内完成更多的任务。

发明内容

本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种操作简便、方法可靠、性能稳定的革兰染色二步法自动染色仪。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：

一种革兰染色二步法自动染色仪，其特征在于，该染色仪由染色池、清洗池、暖气流干燥池、机械手、轨道及显示屏组成，所述的染色池有两个，第一染色池、第二染色池、清洗池及暖气流干燥池依次排列设置在染色仪的前部，所述的机械手设在染色仪的上部，该机械手的前端内可放置待染片或质控片，机械手的后端与所述的轨道连接，所述的显示屏设在染色仪顶部的一侧，取待检材料均匀涂在待染片或质控片上，将待染片或质控片置于机械手中，机械手通过升降移动将前端置于第一染色池中进行第一步染色，再通过机械手在轨道上的水平移动，将机械手依次置于第二染色池、清洗池、暖气流干燥池中，经第二次自动染色、清洗及干燥后，再对待染片或质控片进行镜检。

所述的第一染色池内的染料为0.5-1.0wt％的结晶紫水溶液。

所述的第二染色池内的染料为碱性复红、碘及碘化钾的乙醇溶液。

所述的碱性复红的浓度为0.2-0.4wt％，所述的碘的浓度为0.1-0.2wt％，所述的碘化钾的浓度为0.4-0.6wt％。

所述的暖气流干燥池内温度为50-60℃。

所述的机械手可以水平及竖直移动，将该机械手前端依次置于染色池、清洗池及暖气流干燥池中。

所述的机械手的前部可放置6-24片待染片或质控片。

所述的待检材料包括含革兰氏阳性菌及革兰氏阴性菌的细菌培养物或分泌物等。

该自动染色仪还可应用在二步法的抗酸和血细胞染色中。

与现有技术相比，本发明具有以下优点：

(1)使用本发明的生产工艺及操作流程简单，对水质无特殊要求，生产及检验过程中无有毒、有害物质投入和产生；

(2)本发明可提供更快速、易标准化的实验结果，自动染色后镜检，在涂片中央即可见到染成红色的革兰阴性菌和深紫色的革兰阳性菌；