[发明专利]一种纤维素原料的糖化方法

权利要求书

1.一种纤维素原料的糖化方法，其主要步骤为：

1)将纤维素原料烘干后粉碎，按固液质量比1∶10-1∶50加入GS-2液体培养基；

2)将嗜热厌氧纤维素降解菌接种到含有碳源的液体培养基中，于50-60℃厌氧培养至OD600为0.5-1.5，制备嗜热厌氧纤维素降解菌的种子液；

3)将种子液接种至步骤1中含纤维素原料的液体培养基中，50-60℃厌氧密封发酵至纤维素原料利用完全；

4)固液分离，取上清液。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，纤维素原料粉碎至20-60目。

3.一种纤维素原料的糖化方法，其主要步骤为：

1)将嗜热厌氧纤维素降解菌接种到含有碳源的GS-2液体培养基中，于50-60℃厌氧培养至OD₆₀₀为0.5-1.5，制备嗜热厌氧纤维素降解菌的种子液；

2)将种子液按1-15％的接种量接种至步骤1的GS-2液体培养基中，于50-60℃厌氧密封发酵至纤维素原料利用完全；

3)将步骤2中的发酵液离心，冷却后，上清液中加入纤维素颗粒；

4)提取步骤3产物中的纤维小体，按10-50U/g比例加入至含有固液质量比1∶10-1∶50纤维素颗粒和pH为6-7磷酸盐缓冲液的悬浮液中，50-70℃进行酶解；

5)固液分离，取上清液。

4.根据权利要求2所述的方法，其中，纤维素颗粒为100-200目。

5.根据权利要求2所述的方法，其中，磷酸盐缓冲液的组成为：0.07-0.137mol/L磷酸二氢钠，0.01-0.063mol/L磷酸氢二钠，3-5mM氯化钙，20-25mM乙酸钠。

6.根据权利要求1或2所述的方法，其中，每升GS-2液体培养基的组成为：1-1.5g磷酸二氢钾，2-2.9g磷酸氢二钾，8-10g MOPS(3-吗啉丙磺酸钠盐)，1-3g二水柠檬酸钠，1.5-2.1g尿素，0.7-1.0g六水氯化镁，100-150mg二水氯化钙，1-1.25mg六水硫酸亚铁，4-6g酵母提取物和0.5-1g半胱氨酸盐，并且添加0.08-0.15ml 99％冰醋酸。

7.根据权利要求1或2所述的方法，其中，嗜热厌氧纤维素降解菌包括高温梭菌：Clostridium thermocellum和Clostridium straminisolvents；以及高温厌氧菌Thermoanaerobacter brockii、Thermoanaerobacteriummathranii、Thermoanaerobacter saccharolyticum。

8.根据权利要求1或2所述的方法，其中，纤维素降解过程整个降解体系处于无氧、密闭空间，且充入1-10个大气压的氮气/氢气混合气，其中氢气含量为0-10％。