[发明专利]假黑盘菌素成熟多肽二聚体融合蛋白及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于基因工程领域，具体涉及假黑盘菌素成熟多肽二聚体融合蛋白及其制备方法。

背景技术

抗菌肽(antimicrobial peptides，AMPs)是指一类由12～100个氨基酸组成、带有净正电荷、表现两亲性的且具有抗菌活性的小分子多肽。有关抗菌肽的研究已经有50多年的历史，迄今为止，已鉴定各种不同宿主来源的抗菌肽约有880种(Brogden K.A.，2005)。抗菌肽由于其广谱的抗菌活性(包括针对革兰氏阳性细菌，革兰氏阴性细菌、真菌、甚至病毒等)而受到许多研究者的关注。特别是近年来，随着抗生素的滥用而导致带有抗生素抗性的致病菌的不断出现，急需开发出新一代的抗菌药物。许多研究者认为，抗菌肽巨大的药用潜力将有望成为抗生素的替代品之一。因此，近年来有关抗菌肽的各种研究进展都非常迅速，其中包括从抗菌肽的纯化、表征、基因克隆及重组表达到晶体结构的解析、分子结构与功能关系的研究，人们对抗菌肽的了解将更加广泛和深入。

2003年，Mygind等人(Mygind P.H.，et al.，2005)首次报道从丝状真菌—假黑盘菌(Pseudoplectania nigrella)中鉴定和纯化出一种defensin家族的抗菌肽—假黑盘菌素(plectasin)，并解析了该多肽的三维结构(PDB ID：1ZFU)。假黑盘菌素的氨基酸序列和结构分析表明：它具有哺乳动物抗菌肽defensins家族的特征，但它的二硫键排列方式又不同于任何一种亚家族，而与昆虫来源的一些defensins相同。通过体外抑菌实验，发现假黑盘菌素对多种常见的人类革兰氏阳性病原细菌—包括抗生素敏感型及其耐药菌株都具有较强的抗菌作用(如表1所示)，而且其抑菌浓度与杀菌浓度没有显著性差异。

表1.假黑盘菌素可作用于多种革兰氏阳性病原细菌

  链球菌属  (Streptococcus)  葡萄球菌属  (Staphylococcus)  肠道球菌属  (Enterococcus)  棒状杆菌属 (Corynebacterium)  芽孢杆菌属  (Bacillus)  S.pneumoniae  S.aureus  E.faecalis  C.diphtheriae  B.cereus  S.pneumoniae PRSP  (青霉素抗性)  S.aureus MRSA  (二甲氧基苯青霉素抗性)  E.faecium  C.jeikeium  B.thuringiensis  S.pyogenes  S.epidermidis  Misc.Bacillus  S.pyogenes ERSP  (红霉素抗性)  S.epidermidis MRSE  (二甲氧基苯青霉素抗性)  E.faecium VREF  (万古霉素抗性)  Misc.(Group B，C，G)  Misc.(Staphylococci)