[发明专利]鱼肉制品中鳕鱼种源的检测方法在审
申请号: | 201010150291.4 | 申请日: | 2010-03-17 |
公开(公告)号: | CN102191316A | 公开(公告)日: | 2011-09-21 |
发明(设计)人: | 高宏伟;林超;孙敏;刘彩霞;梁成珠 | 申请(专利权)人: | 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;G01N21/64;C12N15/11 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 266002 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 鱼肉 制品 鳕鱼 检测 方法 | ||
1.一种鳕鱼物种鉴定的快速检测方法,其特征在于其中的引物:
上游引物CO88F:5-GGCTTTGGGAACTGACTC-3;
下游引物CO88R:5-AAAGGAGCAGGAAAGATGG-3。
2.一种使用权利要求一所述的快速鉴定鳕鱼物种的检测方法,其特征是依次包括下列步骤:
(1)待检样品的DNA提取;
(2)鳕鱼CO I基因的实时荧光PCR扩增:
在装有24μL的PCR扩增反应液的反应管中加入1μL的待检样品DNA,混匀。按照下述步骤完成PCR扩增。
94-95℃ 2-4min,1个循环;
94-95℃ 10-60s,61℃ 10-60s,共40个循环;
95℃ 15s,60℃ 15s,20min内升温至95℃,95℃ 15s。
(3)使用熔解曲线分析PCR产物。
PCR产物的熔解曲线的单一熔解峰出现在80.5±1℃。
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