[发明专利]一种从活性污泥中快速筛选生物破乳菌的方法

权利要求书

1.一种从活性污泥中快速筛选生物破乳菌的方法，其特征在于从活性污泥中快速筛选生物破乳菌的方法按以下步骤进行：一、向装有150ml液体无机盐培养基的三角瓶中接种活性污泥，在温度为28～30℃、摇床转数为140r/min的条件下培养7d，得富集菌液，然后转接到新鲜的液体无机盐培养基中，在温度为28～30℃、摇床转数为140r/min的条件下培养7d，重复转接3次，得菌液；二、采用蓝胶平板培养基或油平板培养基对菌液进行划线分离培养，培养条件为倒置于28～30℃的生化培养箱中培养48～72h，然后挑取阳性单菌落进行划线纯化培养，直至得到菌落及菌体形态一致的菌株；三、将菌株接种于装有100ml液体无机盐培养基的三角瓶中，在温度为30℃、摇床转数为140r/min的条件下培养3d，得全培养液；四、将0.2ml经过油红O染色的煤油滴加到有30ml蒸馏水且直径为10cm的培养皿中，煤油膜铺开稳定后，再向煤油膜表面滴加20μl全培养液，静止30s后测定排开油圈的直径，选取直径d≥3.0cm的菌株；五、将步骤四中所得菌株接种于装有100ml液体无机盐培养基的三角瓶中，在温度为30℃、摇床转数为140r/min的条件下培养3d，得全培养液；六、向装有5mLO/W型乳状液的磨口具塞比色管中加入2mL步骤五中所得全培养液，震荡后静止，在室温下进行破乳，24h后选取排油率≥50%的菌株，即完成从活性污泥中快速筛选生物破乳菌；其中步骤一中活性污泥按体积比为25%的量接种。

2.根据权利要求1所述的一种从活性污泥中快速筛选生物破乳菌的方法，其特征在于步骤一、步骤三和步骤五中液体无机盐培养基的成分均相同，液体无机盐培养基由4.0g的NH₄NO₃、4.0g的K₂HPO₄、6.0g的KH₂PO₄、0.2g的MgSO₄·7H₂O、1ml的微量元素溶液、40ml的液体石蜡和1000mL的去离子水中组成，所述的微量元素溶液由1000mg的CaCl₂·2H₂O、1000mg的FeSO₄·7H₂O和1400mg的EDTA溶于1000mL的去离子水中组成。

3.根据权利要求1所述的一种从活性污泥中快速筛选生物破乳菌的方法，其特征在于步骤一中活性污泥来自城市污水处理厂曝气池。

4.根据权利要求1所述的一种从活性污泥中快速筛选生物破乳菌的方法，其特征在于步骤二中蓝胶平板培养基由1.0g的牛肉膏、20g的葡萄糖、5g的蛋白胨、0.2g的酵母膏和20g的琼脂粉溶于蒸馏水1000ml中组成。

5.根据权利要求1所述的一种从活性污泥中快速筛选生物破乳菌的方法，其特征在于步骤二中油平板培养基由0.1g的(NH₄)₂SO₄、0.2g的NH₄NO₃、0.03g的MgSO₄、1g的KH₂PO₄、0.4g的Na₂HPO₄、0.05g的酵母粉、20g的琼脂粉、浸过液体石蜡的粗滤纸和1000ml的蒸馏水组成。