[发明专利]一种通过胚抢救获得植物嫁接嵌合体后代的方法

权利要求书

1.一种通过胚抢救获得植物嫁接嵌合体后代的方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)在十字花科植物嫁接嵌合体的幼胚败育的前1天摘取子房；

(2)将摘取的子房先消毒，后在超净工作台上用无菌蒸馏水冲洗；

(3)将冲洗后的子房置于铺有用营养液充分浸泡过的滤纸的培养皿上，剖开子房的一端，然后将子房沿腹缝线撕开，选取子房内呈淡绿色且有光泽的胚珠；将胚珠连同胚柄以及与胚柄相连的子房壁组织一同切下并接种到发育培养基上，使胚柄和子房壁组织与培养基相接触；接种后的胚珠先于25±2℃的黑暗条件下培养12～24小时，再进行光照培养，所述光照培养的温度为25±2℃、光照强度为30～60μmol m^-2s^-1、光照时间为8～12小时/天；

(4)在胚珠成熟为种子后，将种子摘下后接种于发芽培养基上于25±2℃的黑暗条件下进行培养使种子萌发；

(5)在种子萌发长出真叶后将幼苗先转移到继代培养基上培养，后再转移至生根培养基上生根，在继代培养基和生根培养基上进行培养的温度为25±2℃、光照强度为80～120μmol m^-2s^-1、光照时间为12小时/天；

(6)将生根后的幼苗从生根培养基中取出，洗掉根部的培养基并将幼苗移栽至装有基质的营养钵中炼苗6～12天，后将幼苗移至田间，从而获得植物嫁接嵌合体后代。

2.根据权利要求1所述的通过胚抢救获得植物嫁接嵌合体后代的方法，其特征在于：在所述步骤(3)中，所述营养液为3％蔗糖溶液。

3.根据权利要求1所述的通过胚抢救获得植物嫁接嵌合体后代的方法，其特征在于：在所述步骤(3)中，将胚珠接种到发育培养基时的接种密度为1～3个胚珠/厘米²。

4.根据权利要求3所述的通过胚抢救获得植物嫁接嵌合体后代的方法，其特征在于：所述接种密度为1个胚珠/厘米²。

5.根据权利要求1所述的通过胚抢救获得植物嫁接嵌合体后代的方法，其特征在于：在所述步骤(3)中，所述发育培养基的配方为MS+3％蔗糖+0.8％琼脂+400mg/L谷氨酰胺+400mg/L水解酪蛋白+0.2％活性炭，pH＝5.8。

6.根据权利要求1所述的通过胚抢救获得植物嫁接嵌合体后代的方法，其特征在于：在所述步骤(4)中，所述发芽培养基的配方为1/2MS+3％蔗糖+0.8％琼脂+0.2mg/L 6-苄氨基嘌呤。

7.根据权利要求1所述的通过胚抢救获得植物嫁接嵌合体后代的方法，其特征在于：在所述步骤(5)中，所述继代培养基的配方为1/2MS+3％蔗糖+0.8％琼脂。

8.根据权利要求1所述的通过胚抢救获得植物嫁接嵌合体后代的方法，其特征在于：在所述步骤(5)中，所述生根培养基的配方为1/2MS+3％蔗糖+0.8％琼脂+0.1mg/Lα-萘乙酸。

9.根据权利要求1所述的通过胚抢救获得植物嫁接嵌合体后代的方法，其特征在于：在所述步骤(6)中，所述基质为蛭石和珍珠岩，蛭石和珍珠岩的体积比为2∶1。

10.根据权利要求1所述的通过胚抢救获得植物嫁接嵌合体后代的方法，其特征在于：在步骤(6)中进行炼苗时，先在幼苗上覆盖薄膜并遮荫，在炼苗2～4天后逐渐揭开薄膜使幼苗适应外界环境。