[发明专利]一种人血白蛋白的生产方法

权利要求书

1.一种人血白蛋白的生产方法，其特征在于：采用由人肝细胞系或者人肝细胞中分离得到的人肝细胞株作为人血白蛋白培养母体，使人肝细胞株在细胞发生器的培养基中、运用细胞培养技术获得富含人血白蛋白的人血白蛋白溶液，在将所获得的人血白蛋白溶液经分子筛分离得到可用于临床医学使用的人血白蛋白溶液，或者进一步经冷冻干燥后获得人血白蛋白干粉。

2.如权利要求1所述的一种人血白蛋白的生产方法，其特征在于：所述的培养基由基础培养基和添加培养基组成，其中的基础培养基由每升含量为：290.00mg/L L-精氨酸、50.00mg/L L-门冬酰胺、20.00mg/L L-门冬氨酸、1.00mg/L盐酸硫胺素、20.00mg/L L-谷氨酸、10.00mg/L 甘氨酸、15.00mg/L L-组氨酸、20.00mg/L L-羟脯氨酸、50.00mg/L L-异亮氨酸、0.20mg/L核黄素；40.00mg/L L-赖氨酸盐酸盐、15.00mg/L L-甲硫氨酸、15.00mg/LL-苯丙氨酸、20.00mg/L L-脯氨酸、30.00mg/L L-丝氨酸、20.00mg/L L-苏氨酸、5.00mg/L L-色氨酸、23.19mg/L L-酪氨酸、1.00mg/L 盐酸吡哆醇、1.00mg/L 对氨基苯甲酸、1.00mg/L 烟酰胺、48.84mg/L 无水硫酸镁、676.13mg/L 无水磷酸二氢钠、400.00mg/L 氯化钾、6000.00mg/L 氯化钠、2000.00mg/L 葡萄糖、1.00mg/L 还原型谷胱甘肽、5mg/L 还原型辅酶Q₁₀ 0.005mg/L 维生素B₁₂、0.20mg/L 生物素、0.25mg/L D-泛酸钙、1.00mg/L 叶酸组成；其中的添加培养基由浓度在0.2～4mML-谷氨酰胺、L-亮氨酸、L-赖氨酸、L-蛋氨酸组成。

3.如权利要求1所述的一种人血白蛋白的生产方法，其特征在于：所述人血白蛋白的方法的具体制作步骤为：

A、按照培养基的组成成分进行基础培养基的配制、并将基础培养基的pH值调至6～8，在培养器中对基础培养基进行121℃温度条件下进行不少于10分钟的杀菌处理；

B、在培养器的基础培养基中加入1～10％体积的人血白蛋白培养母体，并加入适量浓度在0.2～4mM的多种氨基酸，让其在15～40℃温度、5％CO₂体积浓度的环境中，并以300rpm搅拌转数条件下无菌培养24～48小时，获得富含人血白蛋白细胞溶液；

C、用分子筛对B步骤获得的人血白蛋白细胞溶液进行分离，并对所得的分离液在温度15～40℃条件下调pH值调至6～8，得到纯度在90％以上的人血白蛋白溶液；

D、用压滤机对步骤C获得的进行压滤获得纯度在95％以上的人血白蛋白溶液；或者进一步经冷冻干燥后获得人血白蛋白干粉。

4.如权利要求1所述的一种人血白蛋白的生产方法，其特征在于：所述人血白蛋白的方法的具体制作步骤为：

A、按照培养基的组成成分进行基础培养基的配制、并将基础培养基的pH值调至6～8，在培养器中对基础培养基进行121℃温度条件下进行不少于10分钟的杀菌处理；

B、在培养器的基础培养基中加入1～10％体积的人血白蛋白培养母体，并加入适量浓度在0.2～4mM的多种氨基酸，让其在15～40℃温度、5％CO₂体积浓度的环境中，并以300rpm搅拌转数条件下无菌培养24～48小时，获得富含人血白蛋白细胞溶液；

C、用离心机对B步骤获得的人血白蛋白细胞溶液进行分离，并加入适量乙醇，在4℃下进行30分钟的搅拌处理，随后进行离心分离，除去乙醇溶剂相；再次加入4℃的冷乙醇，并在4℃下搅拌120分钟后，通过压滤机压滤后获得有效含量在82％左右的人血白蛋白细胞溶液；

D、用冷冻干燥机对C步骤获得的提取液进行10小时以上冷却至0℃处理，得到纯度99.90％的人血白蛋白冷冻干粉。