[发明专利]诱导提高生防酵母对果实病害防治效力方法及所用培养基

说明书

技术领域

本发明涉及的是果实采后病害防治技术领域。

背景技术

传统上，国内外对果实采后病害的控制主要依赖于杀菌剂。但是，随着人们对食品安全和环境保护意识的不断增强，化学杀菌剂的使用范围和剂量受到了越来越严格的限制。在欧美发达国家，许多高效但存在食品安全和环境污染隐患的化学杀菌剂被禁止使用。因此，研究、开发能替代化学杀菌剂的方法和技术具有重大的社会意义和广阔的应用前景。

在众多被研究的可能替代化学杀菌剂的方法中，利用拮抗微生物，特别是拮抗酵母抑制采后果实病害的生物防治技术是当前国内外最为关注的新型采后病害控制方法之一(Droby等，2009)。这主要是由于酵母具有遗传稳定、抑菌谱广、效价高、一般不产生对人和寄主植物有害的代谢产物、安全性高等特点；且其对营养要求低，生长快；并有对多种胁迫、逆境具有较强的耐受力，对大多数杀菌剂不敏感，并能与多种其它化学和物理处理相容。

但目前国内外已报道，甚至已商业化开发的拮抗酵母对果实病害的控制效力与化学杀菌剂相比还存在差距(Droby等，2009)。而且由于国内外研究的果实病害生防酵母均为非模式酵母，其遗传背景信息大多不明确，对其生防生理代谢的研究也尚少，严重限制了定向提高果实生防酵母活性技术的发展。

几丁质，又称甲壳素，广泛分布于虾蟹壳、软体动物的外壳与内骨骼，节肢动物的外骨骼及真菌、酵母菌等微生物细胞壁中。几丁质不仅资源丰富，而且具有多种重要的生物学特性，因此几丁质的开发利用深受国内外的关注。一般认为，细菌细胞壁主要由肽聚糖等成分组成，丝状真菌细胞壁的主要成分是几丁质，而酵母细胞壁的主要是由β-葡聚糖(约占细胞壁干重35-60％)和几丁质(约占细胞壁干重1.5-6％)等成分组成。

中国发明专利(专利号03135134.4，一种防治植物寄生线虫的生防制剂)显示与含有几丁质等成分的物质混合后，能提高中华轮枝菌对防治植物寄生线虫的效果。中国发明专利(专利号：ZL200410075042.8，海洋小单孢菌抗菌活性物质发酵促进剂)将几丁质作为用于海洋小单孢菌(一种放线菌)抗菌活性物质发酵促进剂，可提高对枯草芽孢杆菌和念珠菌的抗菌效价。中国发明专利(专利号200510039128.X，一种抗灰霉病的生物杀菌剂及其制备方法)通过含几丁质等培养基培养木霉菌，可防治植物的灰霉病。此外，中国国家发明申请号：200710057189.8(一种利用表面活性剂提高绿色木霉生防活性的方法)公开了一种利用表面活性剂提高绿色木霉生防活性的方法。该方法在绿色木霉孢子培养后，与含有几丁质等物质混和，可以提高对蔬菜灰霉病、白粉病等的防治效果，提高绿色木霉在植株的定殖能力。中国国家发明申请号：200710300087.4(一种防治烟草黑胫病的菌株及其菌剂)公开了一种以0.8～2.0％胶体几丁质为碳源培养淡紫拟青霉的方法，通过该方法可提高其对烟草黑胫病的防治能力。此外，中国发明专利(专利号ZL200510090063.1，一种酵母拮抗菌的培养方法及其专用培养基)还公开了一种罗伦隐球酵母的培养基配方，该培养基由柠檬酸、大豆蛋白胨、硫酸锰、氯化钙和水组成。

但是，目前还没有专门用于诱导提高生防酵母对果实病害防治效力的培养基。

参考文献：

Droby S.，Wisniewski M.，Macarisin D.，Wilson C.2009.Twenty years of postharvestbiocontrol research：Is it time for a new paradigm？Postharvest Biology and Technology 52：137-145.(爵劳比等，2009，20年采后生物防治研究：采后生物学和技术，52：137-145.)。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种诱导提高生防酵母对果实病害防治效力的培养基，以及利用该培养基进行的诱导提高生防酵母对果实病害防治效力的方法。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种诱导提高生防酵母对果实病害防治效力的培养基，包括活化培养基和种子培养基；

活化培养基为：牛肉浸膏8g、酵母粉5g、葡萄糖2～30g、琼脂20g和几丁质1～50g，水定容至1000ml，高压灭菌后得NYCA活化培养基；

种子培养基为：牛肉浸膏8g、酵母粉5g、葡萄糖2～30g和几丁质1～50g(较优为1～20g)，水定容至1000ml，高压灭菌后得NYCB种子培养基。