[发明专利]一种污泥中痕量雌激素含量的检测方法

权利要求书

1.一种污泥中痕量雌激素含量的检测方法，其特征在于该方法包括如下步骤：

（1）污泥样品预处理

取1g经冷冻干燥后污泥样品，加入0.5mL 1.5×10^-3mol/L 的NaN₃溶液，搅拌均匀后风干；向上述干燥后的污泥样品中加入10mL丙酮振荡30min后，在2000rpm下离心30min，收集上清液，重复两次；离心后的污泥样品风干后，采用快速溶剂萃取仪进行萃取，萃取剂为丙酮，其溶剂量为120-140mL，萃取液与上述两次振荡离心后的上清液合并混匀得到提取液；所采用的快速溶剂萃取条件为：温度60℃，压力10342.5kPa，静态提取2次，各8min；Waters公司的HLB固相萃取柱的活化顺序为：5mL色谱纯乙酸乙酯、5mL色谱纯甲醇及10mL超纯水，流速为1mL/min；取50mL上述提取液加入1000mL蒸馏水后混匀，采用已活化的固相萃取柱对该混合液进行固相萃取富集，控制流速为3mL/min；萃取结束后真空抽干HLB柱5min，以去除水分；利用2×3mL乙酸乙酯洗脱HLB柱，洗脱液收集于10mL玻璃离心管中，控制流速为1mL/min，洗脱液在氮气流下缓慢吹干，加入200μL乙腈/水等体积比混合液，漩涡混合，冷藏待测。

（2）利用液相色谱-串联质谱联用分析雌激素浓度

色谱柱： Nova-Pak C18，3.9mm×150mm×4μm；

梯度洗脱：采用甲醇和pH=10的氨水为流动相，甲醇的比例在0-1.2min内由15%升到70%，1.2-2.0min内升到90%，2.0-3.0min内升到98%，3.0-6.1min维持在98%，6.1-6.2min内降至15%，6.2-10min内维持在15%，以上百分比均为体积百分比；

（3）标准曲线的绘制，以外标法进行定量测定

（4）样品的测定

采集待测污泥样品，按步骤（1）对污泥样品进行预处理，再按步骤（2）进行液相色谱-串联质谱联用检测，并与步骤（3）得到的标准曲线比较，通过换算最终得到待测污泥样品中雌激素的含量。

2.根据权利要求1所述污泥中痕量雌激素含量的检测方法，其特征在于，还包括采用浸泡加标方式测定回收率的步骤，添加量为0.5ng/g。

3.根据权利要求1所述污泥中痕量雌激素含量的检测方法，其中：所述雌激素为雌酮和17β-雌二醇。