[发明专利]阻断人免疫缺陷病毒入侵的棉酚氨基酸衍生物及制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及药物治疗领域，更具体涉及一种阻断人免疫缺陷病毒入侵的棉酚氨基酸衍生物，同时还涉及一种阻断人免疫缺陷病毒入侵的棉酚氨基酸衍生物的制备方法，还涉及一种阻断人免疫缺陷病毒入侵的棉酚氨基酸衍生物在制备艾滋病药物中的用途。

背景技术

人免疫缺陷病毒-I(HIV-1)在世界和我国流行，但至今尚未研制出高效的疫苗。因此高效价廉的治疗药物的研制仍是防治艾滋病的当务之急。在侵入抑制药物方面，二十世纪九十年代初，Wild及其同事于1992年首次报道了高效的HIV-1侵入抑制肽(Proc Natl Acad Sci USA，1992，89：10537-41；Proc.Natl Acad Sci USA，1994，91：9770-74)次年姜世勃及其同事也发现抑制多肽，可阻断HIV-1侵入细胞(Nature 1993，365：113)。上述多肽系衍生于HIV-1gp41的7肽重复序列HR1(N端肽)和HR2(C端肽)，姜世勃等发现的C端肽中的一种-简称T20已于2003年被美国FDA批准上市，商品名为Fuzeon，成为第一种新型抗艾滋病毒的药物一一融合抑制剂。抗HIV-1多肽的作用机制的研究(Nat Struct Biol，1995，2：1075-82；Cell，1997，89：263-73；Nature，1997，387：426-28.)表明gp120结合到CD4辅助受体上后，gp41通过HR1和HR2相互作用发生构象变化，形成具有融合作用的6聚体核心结构。该结构将病毒膜和靶细胞膜结合起来导致病毒和细胞的融合。在上述中间状态时C端肽HR2可结合到病毒gp41的HR1上，阻止六螺旋束的形成，从而抑制病毒和靶细胞的融合(Curr Pharm Des，2002，8：563-80)。Fuzeon是由36个氨基酸组成的多肽，需经化学方法合成。因此其价格非常昂贵，是美国最贵的一种药物。一位艾滋病患者年用药费为25000美元以上，此外T20只能通过静脉注射用药，每天需注射两次。为了改进这类多肽药物价格高昂的生产途径，倪凌等报导了HIV-1gp41七肽重复序列的HR2、HR1和HR2(HR212)组成的三螺旋蛋白，企图使抑制剂的制备方法由化学合成改变为基因表达，用HR212的基因DNA克隆以各种载体表达的HR212。试验证明所表达的HR212与T20具有同等的抑制HIV-1的效果(Biochem.and Biophy.Res.Commun，2005，332：831-836)。其稳定性和抗蛋白酶降解的能力高于T20(Virology，2008，377：80-87)，但尚需解决HR212在人体内直接表达的途径。许多研究者致力于抗HIV-1侵入的小分子化合物的研制，姜世勃等曾研究了许多低分子化合物对HIV-1侵入细胞的抑制作用(Curr Pharm Des，2002，8：563-80)。瑞士辉瑞公司所研发的Maraviroc(Antimicrob Agents Chemother，2005，49(11)：4721-32)于2007年8月被美国FDA优先审批的小分子抗HIV-1侵入抑制剂。Maraviroc用于阻止以CCR5为辅助受体的HIV-1的侵入。Maraviroc的作用机理是通过阻断病毒侵入CCR5的联合受体来阻断其侵入健康细胞，而不是在血液癌细胞中(Drug Metab Dispos.，2005，33(4)：587-95)。因此，临床用药前，需进行CCR5的检测，以确定患者是否适用于Maraviroc作为侵入抑制剂，因此它不是对所有艾滋病人都有效的一种治疗药物，而且价格仍然昂贵，一名患者每年用药费用为10500美元。需要进一步的研制对所有艾滋病人有效的且价廉的低毒性的HIV-1侵入抑制剂。这正是本发明的研究目标。

本发明公布的新技术是氨基酸化的棉酚。曾报导棉酚在体外有抗HIV-1活性(Contraception 1989，579-587)，但其抑制活性不强。后来的研究发现不同旋光性的棉酚抗HIV活性表现出很大的差异，右旋棉酚几乎没有活性，在接近半数细胞毒性浓度下也没有明显的抗病毒作用；左旋棉酚能抑制HIV-1侵入细胞，其半数抑制浓度为2.0μM；左旋棉酚有较弱的细胞毒性，对H 9细胞的半数毒性浓度为5.2μM(Antimcicrob Agents Chemother 1989，2149-2151)。本发明所研制的氨基酸化的左旋棉酚对HIV-1的抑制活性比单独的左旋棉酚提高20倍，毒性只有左旋棉酚的十分之一，治疗指数提高了两百多倍。

发明内容