[发明专利]一种用于分离、提纯单克隆抗体和抗体球蛋白的亲和色谱填料及其制备方法

权利要求书

1.一种用于分离、提纯单克隆抗体和抗体球蛋白的亲和色谱填料，由固相载体及与其以共价键连接的配基组成，所述配基为蛋白A，其特征在于，所述固相载体为单分散多孔微球。

2.根据权利要求1所述的用于分离、提纯单克隆抗体和抗体球蛋白的亲和色谱填料，其特征在于，所述单分散多孔微球的材料选自高分子聚合物、硅胶、碳化硅、氧化铝、氯化物和陶瓷微球中的任一种。

3.根据权利要求1所述的用于分离、提纯单克隆抗体和抗体球蛋白的亲和色谱填料，其特征在于，所述单分散多孔微球的直径为1～300μm，孔径为10～3000nm。

4.根据权利要求1所述的用于分离、提纯单克隆抗体和抗体球蛋白的亲和色谱填料，其特征在于，所述的单分散多孔微球表面经处理后含有一级醇官能团。

5.根据权利要求1所述的用于分离、提纯单克隆抗体和抗体球蛋白的亲和色谱填料，其特征在于，所述的蛋白A为由基因工程手段获得。

6.根据权利要求1所述的用于分离、提纯单克隆抗体和抗体球蛋白的亲和色谱填料的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)接活化的空间臂：取1份经处理后含有一级醇官能团的单分散多孔微球，加入0.1～10份，0.1～3.0mol/L的KOH和0.1～10份含环氧官能团化合物，于10℃～100℃振荡或搅拌反应1～72h后，产物经过滤、洗涤备用；

(2)偶联配基：取1份步骤(1)获得的产物，置于含0.1～10份蛋白A的PBS缓冲液，pH 6～7，于10℃～30℃下振荡或搅拌2～72h后，反应物经过滤、洗涤备用；

(3)封闭残全活性基团：取1份步骤(2)所得反应物，加入5～10份的0.05M HCl，在10℃～30℃下振荡或搅拌反应1～24h，产物经过滤、洗涤后保存。

7.一种用于分离、提纯单克隆抗体和抗体球蛋白的亲和色谱填料制成的亲和色谱柱。