[发明专利]改善的SS07-聚合酶偶联蛋白质

权利要求书

1.一种Sso7聚合酶偶联蛋白质，其特征在于，该偶联蛋白质包含与连接于聚合酶结构域的SEQ ID NO：2相同性至少为60％的Sso7结构域，在此Sso7结构域中通过参比SEQ ID NO：2所确定的某表面残基位点的氨基酸用不同氨基酸置换；

其中该表面残基的置换导致其加工能力低于野生型Sso7-聚合酶融合物的加工能力但高于未融合Sso7d结构域时该聚合酶结构域的加工能力。

2.如权利要求1所述的Sso7聚合酶偶联蛋白质，其特征在于，所述表面残基位点选自位点24的色氨酸残基、位点26的缬氨酸残基、位点29的甲硫氨酸残基。

3.如权利要求2所述的Sso7聚合酶偶联蛋白质，其特征在于，所述表面残基位点是位点24的色氨酸残基，置换的氨基酸残基是除了Asp、Glu、Arg、Lys或Pro的此外任何氨基酸。

4.如权利要求3所述的Sso7聚合酶偶联蛋白质，其特征在于，所述置换的氨基酸残基选自甘氨酸、缬氨酸和丙氨酸。

5.如权利要求4所述的Sso7聚合酶偶联蛋白质，其特征在于，所述置换的氨基酸残基是甘氨酸。

6.如权利要求4所述的Sso7聚合酶偶联蛋白质，其特征在于，所述氨基酸残基是缬氨酸。

7.如权利要求1、2、3、4、5或6所述的Sso7聚合酶蛋白，其特征在于，所述聚合酶结构域具有热稳定聚合酶活性。

8.如权利要求7所述的Sso7聚合酶蛋白，其特征在于，所述聚合酶结构域是家族A聚合酶结构域。

9.如权利要求8所述的Sso7聚合酶蛋白，其特征在于，所述聚合酶结构域是ΔTaq聚合酶结构域。

10.如权利要求7所述的Sso7聚合酶蛋白，其特征在于，所述聚合酶结构域是聚合酶B家族成员。

11.如权利要求10所述的Sso7聚合酶蛋白，其特征在于，所述聚合酶结构域是火球菌聚合酶结构域。

12.如权利要求1所述的Sso7聚合酶蛋白，其特征在于，所述Sso7结构域包含SEQ ID NO：2，其中某表面残基位点的氨基酸被不同的氨基酸置换。

13.如权利要求1所述的Sso7聚合酶偶联蛋白质，其特征在于，Sso7结构域包含SEQ ID NO：2，其中位点24的色氨酸残基被选自甘氨酸、丙氨酸和缬氨酸的氨基酸残基置换。

14.如权利要求1所述的Sso7聚合酶蛋白，其特征在于，与含SEQ ID NO：2的Sso7聚合酶融合蛋白相比，该表面残基的置换增加了该聚合酶的引物/模板结合特异性。

15.如权利要求14所述的Sso7聚合酶偶联蛋白质，其特征在于，所述表面残基位点选自位点24的色氨酸残基、位点26的缬氨酸残基和位点29的甲硫氨酸残基。

16.如权利要求15所述的Sso7聚合酶偶联蛋白质，其特征在于，所述表面残基位点是位点24的色氨酸残基，所述置换氨基酸残基是除了Asp、Glu、Arg、Lys或Pro以外的任何氨基酸。

17.如权利要求16所述的Sso7聚合酶蛋白，其特征在于，所述置换氨基酸残基选自甘氨酸、缬氨酸和丙氨酸。

18.如权利要求17所述的Sso7聚合酶蛋白，其特征在于，所述置换氨基酸残基是甘氨酸。

19.如权利要求17所述的Sso7聚合酶偶联蛋白质，其特征在于，其中的氨基酸残基是缬氨酸。

20.如权利要求14、15、16、17、18或19中任一项所述的Sso7聚合酶蛋白，其特征在于，所述聚合酶结构域具有热稳定聚合酶活性。

21.如权利要求20所述的Sso7聚合酶蛋白，其特征在于，所述聚合酶结构域是家族A聚合酶结构域。

22.如权利要求21所述的Sso7聚合酶蛋白，其特征在于，所述聚合酶结构域是ΔTaq聚合酶结构域。

23.如权利要求14所述的Sso7聚合酶蛋白，其特征在于，Sso7结构域包含SEQ ID NO：2，其中某表面残基位点的氨基酸被不同的氨基酸置换。