[发明专利]连翘酯苷用作抗真菌药物增效剂的用途

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，是连翘酯苷用作抗真菌药物增效剂的新用途。

背景技术

连翘酯苷为中药连翘的主要有效成分之一。研究显示，连翘酯苷具有抗微生物、抗病毒、抗氧化、抑制弹性蛋白酶和诱生α干扰素等药理作用，但未见其有抗真菌作用的报道，更未见其作为抗真菌药物增效剂与抗真菌药物联合使用治疗真菌病的报道。

发明内容

本发明提供一种连翘酯苷作为抗真菌药物增效剂的新用途。经体外细胞实验和动物实验表明，连翘酯苷对氟康唑、伊曲康唑、咪康唑、酮康唑等抗真菌药物有明显的增效作用；对于临床耐药性真菌菌株，当抗真菌药物和连翘酯苷合用时，能明显降低抗真菌药物的用药剂量，并增强对耐药真菌的抑制作用，使抗真菌药物恢复对耐药真菌的作用。因此可将连翘酯苷用作抗真菌药物的增效剂，用于不同深部或浅部真菌感染的治疗。

本发明为连翘酯苷开辟了新的用途，将其用于抗真菌药物的增效剂，不仅能提高药物的抗真菌作用，而且在临床真菌耐药性日趋普遍、耐药程度日趋严重的情况下，使抗真菌药物恢复对耐药真菌的作用，还可降低抗真菌药物的用药剂量，从而为患者节省了医疗费用，减少药物的毒副作用。

附图说明

图1为不同浓度的连翘酯苷与氟康唑合用时，治疗深部耐药白念珠菌感染小鼠的肾脏活菌数SDA平板图。

具体实施方式

下面结合实施例和附图，对本发明作详细描述。

实施例1.连翘酯苷和氟康唑联用对不同临床真菌株的作用

材料和方法

1.试药：

连翘酯苷：上海融禾制药科技有限公司，批号090923。

氟康唑注射液：辉瑞制药有限公司，批号9167802。

二甲亚砜：上海世仪生物科技有限公司。

连翘酯苷用二甲亚砜配成溶液浓度为6.4mg/ml。

各试药置于-20℃保存。实验前，将药物取出置于35℃温箱融化，充分混匀，分别进行药效学检验。

2.菌株：

临床株：1)耐药白念珠菌，分103、904、18、38和0710448五株；2)热带念珠菌，分409、936、422、0710453和0710087五株；3)新生隐球菌，分34880和32609两珠。均由上海长海医院真菌室提供，分别采自长海医院不同科室临床样本，并经形态学和生化学鉴定。

所有实验用菌株均于沙堡葡萄糖琼脂培养基(SDA)划板活化，白念珠菌、热带念珠菌和新生隐球菌等球状菌于30℃培养2周后，分别挑取单克隆再次划板活化，取第二次所得单克隆置SDA斜面，用上述方法培养后于4℃保存备用。

3.培养液：

1)RPMI 1640液体培养液：

RPMI1640(Gibco BRL)10g，NaHCO₃2.0g，吗啡啉丙磺酸(Sigma)34.5g(0.165M)，加三蒸水900ml溶解，1N NaOH调pH至7.0(25℃)，三蒸水定容至1000ml，0.22μm微孔滤膜过滤除菌，分装后于4℃保存备用。

2)沙堡葡萄糖琼脂固体培养基(SDA)：

蛋白胨10g，葡萄糖40g，琼脂18g，加三蒸水900ml溶解，加入2mg/ml氯霉素水溶液50ml，调整pH至7.0，以三蒸水定容至1000ml，高压灭菌(121℃，15min)后于4℃保存备用。

3)YEPD培养液：

酵母浸膏10g，蛋白胨20g，葡萄糖20g，加三蒸水900ml溶解，加入2mg/ml氯霉素水溶液50ml，三蒸水定容至1000ml，高压灭菌(121℃，15min)后于4℃保存备用。

4.仪器设备：

Multiskan MK3型酶标检测仪(芬兰Labsystems产品)

隔水式电热恒温培养箱(上海跃进医疗器械厂)

THZ-82A台式恒温振荡器(上海跃进医疗器械厂)

SW-CT-IF型超净化工作台(苏州安泰空气技术有限公司)

5.菌液制备：

实验前，用接种圈从4℃保存的SDA培养基上分别挑取白念珠菌、热带念珠菌和新生隐球菌各球状菌少量，分别接种至1ml YEPD培养液，于30℃，200rpm振荡培养，活化16h，使真菌处于指数生长期后期。然后将各菌液分别加至1mlYEPD培养液中，用上述方法再次活化，培养16h，用血细胞计数板计数，以RPMI 1640培养液分别调整各菌液浓度至1×10³～5×10³CFU/ml。

6.药敏板制备：