[发明专利]检测生物巯基化合物的荧光探针及其合成方法与应用

权利要求书

1.式I所示的化合物：

(式I)

其中，R¹、R²各自独立地选自氢、1-5个碳原子的烷基和3-8个碳原子的环烷基中的一种；R³、R⁴、R⁵独立的选自氢或1～5个碳原子的烷基。

2.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于：所述的R¹、R²中的1-5个碳原子的烷基分别或者同时为甲基，乙基，丙基，烯丙基，异丙基，丁基，异丁基，戊基和异戊基中的一种；

所述的R¹、R²中的3-8个碳原子的环烷基分别或者同时为环丙烷基，环丁烷基，环戊烷基，环己烷基或环庚烷基中的一种；

所述的R³、R⁴、R⁵中的1-5个碳原子的烷基分别或者同时为甲基，乙基，丙基，异丙基，丁基，异丁基，叔丁基和戊基中的一种。

3.根据权利要求1或2所述的化合物，其特征在于：式I所示的化合物为下述1)或2)中的化合物：

1)式I中R¹、R²均为乙基，R³、R⁴、R⁵均为氢的化合物；

2)式I中R¹、R²均为甲基，R³、R⁴、R⁵均为氢的化合物。

4.式I所示化合物的制备方法，包括下述步骤：

1)将式II所示化合物和式III所示化合物在六氢吡啶存在下，于干燥有机溶剂中进行Knoevenage缩合反应，反应完全后，将反应体系冷却至室温，除去所述有机溶剂；然后加入酸进行回流反应，待反应完全，将反应液冷却至室温，加入冰水，并用碱调节所述反应液的pH值至有大量的黄褐色固体析出；并用甲苯或乙醇对所述黄褐色固体进行重结晶得到浅黄色晶体，即为式IV所示的化合物；

(式II)                     (式III)                         (式IV)

其中，式II中的R¹、R²、R³、R⁴均与式I相同，式III中的R⁵与式I相同；

2)将POCl₃溶于干燥的二甲基甲酰胺中，并向其中滴加式IV所示的化合物的二甲基甲酰胺溶液，待滴加完毕，反应液加热回流，反应完毕有固体析出；将反应液倒入冰水中，然后用碱调节反应液的pH值至有大量固体析出，即得到式V所示的化合物；

(式V)

3)将步骤2)所得产物和2，2’-二氨基二苯二硫醚溶于干燥有机溶剂中，惰性气体保护下加热回流，反应完全后，减压除去所述有机溶剂，得到式I所示化合物。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：步骤1)所述缩合反应中式II所示化合物和式III所示化合物的摩尔比为1∶1；所述缩合反应在加热回流的条件下进行8-12小时；步骤1)中所述酸为醋酸和质量浓度为37％盐酸以体积比1∶1混合得到的混酸；步骤1)中所述碱为质量浓度10％-20％的氢氧化钠水溶液。

6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于：步骤2)中POCl₃与式IV所示的化合物的摩尔比为1.5∶1；步骤2)中所述加热回流的时间为0.5-2小时。

7.根据权利要求4-6中任一所述的方法，其特征在于：步骤3)中式V所示化合物和2，2’-二氨基二苯二硫醚的摩尔比为2∶1；步骤3)中所述加热回流的时间为3-5小时；步骤1)和步骤3)中所述干燥的有机溶剂选自下述任意一种：甲醇，乙醇、乙腈、二甲亚砜和二甲基甲酰胺。