[发明专利]辅助鉴定具有不同体重性状鸡的方法及其专用引物

说明书

技术领域

本发明涉及一种辅助鉴定具有不同体重性状鸡的方法及其专用引物。

背景技术

转化生长因子超家族(Transforming growth factor B)是一类在结构上相对保守 的生长因子家族，参与细胞增殖与分化等多种细胞生理活动，在胚胎发育、组织器官 形态发生、细胞的分化、增值及免疫调节等方面都起着重要作用。TGFB2是TGFB家族成 员之一，是影响动物体生长发育的内源性的负调控生长因子。所以，TGFB2基因的变异 对动物的体重有显著的影响。鸡TGFB2基因被定位在3号染色体着丝粒末端70cM左右， 全长70kp，由7个外显子，6个内含子组成。

近几年来，许多研究将影响体重有关的QTLs定位在TGFB2基因所在区域或其区域 附近。Kerje等(2003)以一个F₂资源家系为材料，分别在鸡的3号染色体的50cM 处和117cM处发现影响鸡8日龄体重和46日龄体重的QTLs。Ambo等(2009)研究发 现影响35和41日龄体重性状的QTLs位于3号染色体的50-200cM处。因此，TGFB2 基因可望成为鸡体重性状的候选基因，作为遗传标记应用于鸡分子育种中。

聚合酶链式反应(PCR)技术是一种特异性DNA体外扩增技术。以少量的DNA为模板， 经过变性-退火-延伸的多次循环，以接近指数扩增的形式产生大量的目标DNA分子，目 前，该技术已经成为最常用、也最重要的分子生物学技术之一。PCR产物经过琼脂糖电 泳后即可进行基因型的鉴定工作，检测方法简单易行。

发明内容

本发明的目的是提供一种辅助鉴定具有不同体重性状鸡的方法及其专用引物。

本发明提供了序列表的序列3所示DNA和序列表的序列4所示DNA组成的引物对。

所述引物对可应用于辅助鉴定具有不同体重性状的鸡。

所述引物对可应用于制备辅助鉴定具有不同体重性状鸡的试剂盒。试剂盒中，还 可包括其它PCR分析试剂。如DNA聚合酶、PCR缓冲液、dATP、dGTP、dCTP、dTTP等， 这些PCR分析试剂均可为现有的常规试剂。

本发明还保护辅助鉴定具有不同体重性状鸡的试剂盒，包括所述引物对。

本发明提供的辅助鉴定具有不同体重性状鸡的方法，包括如下步骤(a)或步骤(b)：

(a)以待测鸡的基因组DNA为模板，用所述引物对进行PCR扩增，没有得到336bp PCR产物的鸡的体重在统计学上高于得到336bp PCR产物的鸡的体重；

(b)检测待测鸡的基因组DNA中是否具有序列表的序列2所示DNA片段；基因组 DNA中不具有序列2所示DNA片段的鸡的体重在统计学上高于基因组DNA中具有序列2 所示DNA片段的鸡的体重。

本发明提供的辅助鉴定具有不同体重性状鸡的方法，包括如下步骤(a)或步骤(b)：

(a)以待测鸡的基因组DNA为模板，用所述引物对进行PCR扩增，得到398bp PCR 产物的鸡的体重在统计学上高于没有得到398bp PCR产物的鸡的体重；

(b)检测待测鸡的基因组DNA中是否具有序列表的序列1所示DNA片段；基因组 DNA中有序列1所示DNA片段的鸡的体重在统计学上高于基因组DNA中不具有序列1 所示DNA片段的鸡的体重。

本发明提供的辅助鉴定具有不同体重性状鸡的方法，包括如下步骤(a)或步骤(b)：

(a)以待测鸡的基因组DNA为模板，用所述引物对进行PCR扩增；如果得到398bp PCR产物且没有得到336bp PCR产物，待测鸡的基因型为AA；如果得到336bp PCR产 物且没有得到398bp PCR产物，待测鸡的基因型为BB；如果得到398bp和336bp两种 PCR产物，待测鸡的基因型为AB；AA基因型鸡的体重在统计学上高于AB基因型鸡的 体重；AB基因型鸡的体重在统计学上高于BB基因型鸡的体重；

(b)检测待测鸡的基因组DNA中是否具有序列表的序列1所示DNA片段和序列表 的序列2所示DNA片段；基因组DNA中为序列1所示DNA片段的纯合体，基因型为AA； 基因组DNA中为序列2所示DNA片段的纯合体，基因型为BB；基因组DNA中为序列1 和序列2所示DNA片段的杂合体，基因型为AB；AA基因型鸡的体重在统计学上高于 AB基因型鸡的体重；AB基因型鸡的体重在统计学上高于BB基因型鸡的体重。