[发明专利]一种笃斯越桔根瘤试管内直接诱导、快繁方法

权利要求书

1.一种笃斯越桔根瘤试管内直接诱导、快繁方法，其特征在于步骤如下：

(1)以笃斯越桔根部分蘖的嫩芽为外植体，对外植体进行处理，其嫩芽根瘤诱导的培养基为：1/4MS+IAA0.80mg·L^-1+IBA0.04mg·L^-1+GA₃0.15mg·L^-1，添加蔗糖10g·L^-1，琼脂8.30g·L^-1，调节pH值为5.5，在温度20℃±2℃，光照强度1 200lx条件下培养，光照周期14h·d^-1；

(2)采用已产生根瘤的再生植株的茎节为材料在试管利用节增殖的方法进行快繁，将含有根瘤的试管苗于根上部留1～2叶切下，并将切下的小枝条再切割成一叶一段转接到上述嫩芽根瘤诱导培养基中进行同时腋芽萌发、生长及根瘤再生培养，以38d为一个继代增殖周期，每瓶增殖倍数平均达70以上。

2.按照权利要求1所述的笃斯越桔根瘤试管内直接诱导、快繁方法，其特征在于对外植体进行处理是指在超净工作台上用70％酒精涮洗10s，用含3％次氯酸钠溶液浸泡3min，无菌水冲洗8次；用无菌滤纸吸干表面水分，切除被杀菌消毒剂损伤部分后切割成1～2叶1段作为外植体备用。

3.按照权利要求1所述的笃斯越桔根瘤试管内直接诱导、快繁方法，其特征在于诱导率为95.6％。