[发明专利]一种顶孢霉菌株及顶孢霉菌可湿性粉剂有效
申请号: | 201010169890.0 | 申请日: | 2010-05-12 |
公开(公告)号: | CN102242066A | 公开(公告)日: | 2011-11-16 |
发明(设计)人: | 沈慧敏;张新虎;张海英;宋丽雯;李莉;张莉;田大伟;杨顺义 | 申请(专利权)人: | 甘肃农业大学 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;A01N63/04;A01N25/14;A01P7/04;C12R1/645 |
代理公司: | 北京中恒高博知识产权代理有限公司 11249 | 代理人: | 夏晏平 |
地址: | 730000 *** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 霉菌 可湿性粉剂 | ||
技术领域
本发明涉及微生物领域,具体地,涉及一种真菌顶孢霉菌株及顶孢霉菌可湿性粉剂。
背景技术
由于化学农药的大量使用对环境生态造成了严重的影响,生物防治日益被人们所重视,利用昆虫病原微生物防治害虫是重要的生防手段之一。在昆虫病原微生物中,昆虫的真菌病占据着一个重要地位,在害虫的生物防治中起着非常重要的作用。如我国用布氏白僵菌处理土壤,使花生地的暗黑鳃金龟幼虫虫口下降50%以上,最高达86.6%。昆虫病原真菌作为一类宝贵的生物资源,引起了生物学家的高度重视。现在各国研究应用最多的是白僵菌,其次是绿僵菌,赤霉菌、虫生藻菌等。许多昆虫病原真菌已被广泛开发应用于防治农林害虫、卫生害虫、农田杂草等有害生物。
虫霉目虫霉科真菌大约有150多种,可寄生32个科的120多种昆虫,寄主幼虫、蛹、成虫等虫态均可感染,是蝗虫、蝇类、蛾类、蚜虫、蚧类及螨类的主要寄生菌。虫霉科中有10多种虫霉如逸孢霉属、虫霉属、疫霉属、新接合霉属和虫疫霉属真菌等都可引起蚜虫30%~100%的死亡率。这些真菌对害虫的侵染和流行潜力极强,常引发许多害虫的流行病,在蚜虫等刺吸式口器害虫的自然控制中起着极其重要的作用。因此,开发和利用虫霉目真菌资源用于生物防治具有十分广阔前景。
而甘肃省由于大陆性季节气候的影响,造就了干旱少雨、光热丰富、昼夜温差大,兼具温带季风和大陆气候特征,对引用外来微生物资源带来了一定的限制因素,因此,筛选适合于此种干旱气候的虫霉目真菌资源更显格外重要。
另外,虫霉目真菌制剂的研制也是近年来虫霉研究的热点,近年来报道的新方法虽然在工艺设计上考虑了虫霉的生物学特性,但工艺难度大,成本高,而且后续干燥和保存的难度较大,如海藻盐作为包埋基质虽有许多优点,但存在保水性差、助剂易渗漏、易失水干燥、不利于菌株孢子再复水萌发、机械强度差以及胶球粘连等缺陷。因此,进一步研究寻找优良的虫霉目真菌添加成分或其它材料用于虫霉目真菌菌株加工,提高菌株产孢或感染能力是研发应用的关键。
发明内容
本发明的目的是针对现有真菌微生物在防治技术中的上述缺陷,提出一种适应干旱环境的顶孢霉菌株,该菌株对蚜虫有较强感染力。
本发明的另一个目的是提出一种利用上述菌株经发酵生产产生的孢子粉辅以相应助剂制成的顶孢霉菌可湿性粉剂,该制剂该制剂主要施用在蔬菜和果树上防治甘蓝蚜和桃蚜。
实现上述目的的技术方案如下:
一种顶孢霉菌株,该菌株分类命名为Acremonium hansfordii Ahy1,目前该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)保藏,登记入册的编号为(CGMCCNo.2278),保藏日期是:2007年12月03日。
经鉴定,该菌株具有下述性质:
1、形态特征:
菌落绒毛状,白色后变成桃红色,潮湿,有刺激性气味;菌落生长较快,25℃下10d直径5.5~6.8cm;背面黄色、土黄色至棕色。分生孢子梗稀缺,产孢细胞直立,单生,直接着生于菌丝细胞上,产孢细胞透明,无色,光滑,多数长9.0~30.2μm,基部膨大渐尖呈长瓶形,宽2.1~5.4μm,基部有隔膜。分生孢子纺锤形,光滑透明,6.5~9.8×2.0~3.2μm,L/B 2.7~4.3。多形成粘孢团,少数形成干燥的短链,大量孢子聚集产生微弱的红棕色。
2、培养特征
顶孢霉菌Ahy1生长和产孢的最佳碳源为木糖,菌丝生物量和产孢量分别为1.806mg/mL和7.061×10^6个孢子/mL;最佳氮源为尿素,其菌丝体含量和产孢量分别为0.242mg/mL和54.07×10^6个孢子/mL;最适于顶孢霉菌菌丝生长和产孢的C/N为10∶1。液体培养至6~7d时,菌丝生物量和产孢量均达到高峰,因此液体发酵终止时间应选择在接种后6~7d。
顶孢霉菌株Ahy1加工工艺:一级固体培养最适培养基为麦麸培养基,最佳培养时间为6d;二级液体振荡培养的最适接种液为马铃薯~糖培养液,以120r/min振荡培养(25±1)℃,3d;三级产孢培养介质为低值陈米,初步获得孢子粉,孢子含量为5.8×1010孢子/g,含水量6%,活孢率93.5%。
3、生理生化特性:
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