[发明专利]一种血样中亮氨酸的快速衍生化方法有效
| 申请号： | 201010175165.4 | 申请日： | 2010-05-13 |
| 公开（公告）号： | CN101852788A | 公开（公告）日： | 2010-10-06 |
| 发明（设计）人： | 肖晋芬;宋国新;胡耀铭 | 申请（专利权）人： | 复旦大学 |
| 主分类号： | G01N30/06 | 分类号： | G01N30/06 |
| 代理公司： | 上海正旦专利代理有限公司 31200 | 代理人： | 张磊 |
| 地址： | 20043*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 血样 亮氨酸 快速 衍生 方法 | ||
1.一种血样中亮氨酸的快速衍生化方法，其特征在于具体步骤如下：
(1)将冰冻储存的血样在常温下自然解冻；
(2)自然解冻后的血样中加入过氯酸，充分振荡，脱蛋白处理，取上清液；
(3)在步骤(2)的血清上清液中加入碱溶液，中和至pH为6-7，离心取上清液；
(4)上清液通过阳离子交换树脂柱；
(5)用去离子水充分清洗阳离子交换树脂柱后，用氨水洗脱阳离子交换树脂柱，收集洗脱液；
(6)洗脱液用氮吹仪吹干，加入双(三甲基硅烷)三氟乙酰胺、吡啶和乙酸乙酯，密封；微波反应，控制微波功率为200W-500W，反应时间30s-120s。
2.根据权利要求1所述的一种血样中亮氨酸的快速衍生化方法，其特征在于步骤(2)中所使用的过氯酸体积比浓度为8％。
3.根据权利要求1所述的一种血样中亮氨酸的快速衍生化方法，其特征在于步骤(3)中所使用的碱溶液采用氢氧化钾。
4.根据权利要求1所述的一种血样中亮氨酸的快速衍生化方法，其特征在于步骤(4)中所使用的阳离子交换树脂采用H+型树脂。
5.根据权利要求1所述的一种血样中亮氨酸的快速衍生化方法，其特征在于步骤(5)中所使用的氨水为6mol/l。
6.根据权利要求1所述的一种血样中亮氨酸的快速衍生化方法，其特征在于步骤(6)中加入乙腈。
7.根据权利要求1所述的一种血样中亮氨酸的快速衍生化方法，其特征在于步骤(6)中微波反应功率为300-350W，微波反应时间为100-120s。
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