[发明专利]一种胶体金标记的快速检测条

说明书

技术领域

本发明涉及生物检测，特别涉及一种胶体金标记的快速检测试条。

背景技术

免疫胶体金技术(Immunogold labelling techique)是上世纪80年代继荧光素、放射性同位素和酶三大标记技术后发展起来的固相标记免疫测定技术。该技术主要利用了金颗粒具有高电子密度的特性，当这些标记物在相应的配体处大量聚集时，形成肉眼可见的红色或粉红色斑点，因而用于定性或半定量的快速免疫检测方法中。该技术主要是将特异性的抗原或抗体以条带状固定在硝酸纤维膜上，胶体金结合垫为吸附或涂抹有胶体金标记试剂在玻璃纤维膜，当待测样品加到试纸条一端的样品垫上后，通过毛细作用向前移动到胶体金结合垫上并溶解胶体金结合垫上的胶体金标记试剂后相互反应，再移动至固定的抗原或抗体区域时，待测物金标试剂复合物与之发生特异性结合而被截留，胶体金标记聚集在检测带上，可通过目测得到直观的显色结果；而游离的标记物则越过检测带，从而达到与检测物自动分离的目的。胶体金颗粒本身为红色，不需要加入发色试剂，省却了酶标的致癌性底物及终止液的步骤，对人体无毒害，金标记物比酶标记物更稳定，试验结果可以长期保存而不腿色。免疫胶体金层析技术作为诊断试剂广泛应用到临床后，由于它的快速简便、准确，具有高度特异性和高敏感性，结果直观可靠，而且试剂和样品用量极少，无需仪器设备，简化了烦琐的常规操作过程，同时也减小了因操作引起的误差，是一种目前发展最快的复合型免疫层析技术。被认为是微生物和传染病及寄生虫病诊断技术标准化最有前途的新技术之一，并且可以进一步研发定量或半定量检测试纸条以及通用检测试纸条，因此该技术具有巨大的发展潜力和应用前景。

目前生产的胶体金检测试纸条，是在条状的一定长度的双面胶带一面上粘附着反应层，反应层依次由点样区、胶体金结合区、检测区、检测物回收区组成；点样区为玻璃纤维或硝酸纤维素膜；胶体金结合区铺着一层固定有胶体金标记物的玻璃纤维；检测区为硝酸纤维素膜，其上固定有检测带和质控带；检测物回收区通常为吸水性能较强的纤维材料，如粗纤维吸水膜，相连区域之间的膜材料有部分重叠，且膜材料从下层往上依次为检测区、胶体金结合区、点样区，有利于检测物在膜材料之间泳动。制作时这些膜材料直接与双面胶带粘合，然后将双面胶的另一面贴在一个与胶带相同规格的塑料板上即得到检测试纸条，在检测过程中，当液态待检物滴加到样品吸收膜上，在毛吸作用下，待检物泳动到胶体金垫上，溶解胶体金结合区域的胶体金标记试剂并相互反应生成复合物，在纤维膜的毛吸作用下，复合物向检测区泳动，这个过程中，承载胶体金标试剂的玻璃纤维或其它膜材料与双面胶之间的粘连界面会对胶体金标记试剂的泳动产生阻力，影响检测速度，同时影响胶体金的化学稳定性，影响检测的灵敏性，并导致试纸条的有效期缩短，对生产厂家造成经济损失，而目前未见解决这一问题的文献或生产报道。

发明内容

本发明根据上述领域的缺陷，提供一种胶体金标记的快速检测试纸条。

一种胶体金标记的快速检测试纸条，包括粘连在片状载体材料上的反应层，所述反应层一端到另一端依次为相邻接的点样区、胶体金结合区、检测区、回收区，所述点样区铺有玻璃纤维，所述胶体金结合区铺有胶体金结合垫，所述检测区铺有硝酸纤维素膜，其特征在于：所述反应层还包括胶体金结合垫与片状载体材料之间的一层无纺布。

所述胶体金结合垫为固定有胶体金标记试剂的一层无纺布。

所述胶体金结合垫表面到点样区的玻璃纤维表面覆盖有一层无纺布。

所述胶体金结合垫是将胶体金均匀涂抹于无纺布上。

所述无纺布密度：25-30g/m²，吸水性：60-70ml/m²，扩散性：瞬间扩散，释放性：全部释放

所述片状载体材料为双面胶。

所述双面胶的另一面粘附于硬质防水载体板上。

本发明提供一种胶体金标记的检测试纸条，通过在胶体金结合点垫与片状载体材料之间加一层无纺布材料。待测样品从点样区泳动到胶体金标结合垫后与其上的胶体金标记试剂结合一起泳动到检测区，由于胶体金结合垫与载体材料没有直接粘连，粘连界面不会对胶体金标记标记复合物造成阻力，检测物的泳动速度大大提高，有实验数据证明，本发明的检测试剂条对一般阳性样品(约100mIU/ml)在20秒以内即可在检测区读出检测结果，而其它现有检测试纸条需要60-80秒才会显示检测结果，即泳动速度提高了3倍，见表1。

本发明还提供一种采用无纺布制作胶体金结合垫的检测试剂条，通过对比试验，发现，本发明的检测试剂条上的胶体金标记试剂的稳定性较好。见表2