[发明专利]蛋白质纯化的方法及系统无效
申请号: | 201010175478.X | 申请日: | 2010-05-14 |
公开(公告)号: | CN101885753A | 公开(公告)日: | 2010-11-17 |
发明(设计)人: | 张大慈;许嘉钦 | 申请(专利权)人: | 善笙生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C07K1/22 | 分类号: | C07K1/22;C12N9/20;C12N9/42;C12N9/16 |
代理公司: | 北京连和连知识产权代理有限公司 11278 | 代理人: | 贺小明 |
地址: | 中国台湾桃园*** | 国省代码: | 中国台湾;71 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 蛋白质 纯化 方法 系统 | ||
1.一种纯化重组蛋白的方法,其特征在于,包含:
(a)提供包含淀粉结合蛋白标签化重组蛋白的溶液;
(b)添加该溶液至第一容器,该第一容器包含淀粉结合蛋白结合基质;
(c)抽提碱性缓冲液至步骤(b)的第一容器以获得混合物;
(d)混合该混合物与溶液,该溶液是用于在第二容器中切割淀粉结合蛋白及重组蛋白以生成反应混合物;以及
(e)添加该反应混合物至第三容器,该第三容器包含淀粉结合蛋白结合基质以回收重组蛋白。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,该淀粉结合蛋白结合基质包含:淀粉、分枝淀粉、直链淀粉树脂、糊精树脂或藻酸盐微粒。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(a)的淀粉结合蛋白标签化重组蛋白来自于细胞,且步骤(b)的淀粉结合蛋白结合基质为淀粉。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(b)的第一容器、步骤(d)的第二容器或步骤(e)的第三容器为可抛弃式。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(d)的混合物进一步添加淀粉结合蛋白-内切蛋白酶。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,该淀粉结合蛋白-内切蛋白酶为淀粉结合蛋白-急性严重呼吸道症候群蛋白酶或淀粉结合蛋白-肠激酶。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(a)的溶液具有4至6的pH值。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(c)的缓冲液具有7至11的pH值。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,淀粉结合蛋白标签化重组蛋白于淀粉结合蛋白及目标蛋白间包含有内切蛋白酶识别位置。
10.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(b)的溶液具有4至8的pH值。
11.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,于步骤(e)前进一步包含中和步骤用于调整pH值直到5至7。
12.一种纯化重组蛋白的系统,其特征在于,包含:
装置(a),用于提供包含淀粉结合蛋白标签化重组蛋白的溶液;
装置(b),用于添加该溶液至第一容器,该第一容器包含淀粉结合蛋白结合基质;
装置(c),用于抽提碱性缓冲液至(b)的第一容器以获得混合物;
装置(d),用于将该混合物与溶液混合,该溶液用于在第二容器中切割淀粉结合蛋白及重组蛋白以生成反应混合物;以及
装置(e),用于添加该反应混合物至第三容器,该第三容器包含淀粉结合蛋白结合基质以回收重组蛋白。
13.根据权利要求12所述的系统,其特征在于,该淀粉结合蛋白结合基质包含:淀粉、分枝淀粉、直链淀粉树脂、糊精树脂或藻酸盐微粒。
14.根据权利要求12所述的系统,其特征在于,装置(a)的淀粉结合蛋白标签化重组蛋白来自于细胞,且装置(b)的淀粉结合蛋白结合基质为淀粉。
15.根据权利要求12所述的系统,其特征在于,装置(b)的第一容器、装置(d)的第二容器或装置(e)的第三容器为可抛弃式。
16.根据权利要求12所述的系统,其特征在于,(d)的混合物进一步添加淀粉结合蛋白-内切蛋白酶。
17.根据权利要求16所述的系统,其特征在于,该淀粉结合蛋白-内切蛋白酶为淀粉结合蛋白-急性严重呼吸道症候群蛋白酶或淀粉结合蛋白-肠激酶。
18.根据权利要求12所述的系统,其特征在于,(a)的溶液具有4至6的pH值。
19.根据权利要求12所述的系统,其特征在于,(c)的缓冲液具有7至11的pH值。
20.根据权利要求12所述的系统,其特征在于,淀粉结合蛋白标签化重组蛋白于淀粉结合蛋白及目标蛋白间包含有内切蛋白酶识别位置。
21.根据权利要求12所述的系统,其特征在于,(b)的溶液具有4至8的pH值。
22.根据权利要求12所述的系统,其特征在于,进一步包含中和装置用于调整pH值直到5至7。
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