[发明专利]油菜饼抗菌肽

权利要求书

1.一种油菜饼抗菌肽的分离纯化、稳定性和安全性测试方法，包括：(1)培养基制备；(2)抗真菌活性检验；(3)将一定量的油菜饼磨碎，加200mL 0.05mol/L的pH8.0的Tris-HCl缓冲液，4℃放置12h后，4℃，4000r/min离心30min取上清液；再通过饱和度为60±5％的硫酸铵沉淀、脱盐(透析液选用0.05mol/L的pH 8.0的Tris-HCl缓冲液)、分子筛柱层析(Sephadex G-100，取提取液上样，用0.05mol/L的pH8.0的Tris-HCl缓冲液洗脱)以及高效液相色谱法对粗蛋白进行纯化，将纯化后的分离液冷冻干燥成粉末，用适当体积的0.05mol/L的pH8.0的Tris-HCl缓冲液溶解备用；(4)将提取的油菜饼抗菌肽进行活性测定；(5)聚丙烯酰胺凝胶电泳测定油菜饼抗菌肽的分子大小；(6)对提取的油菜饼抗菌肽进行热稳定性、酸碱稳定性分析；(7)扫描电镜观察油菜饼抗菌肽对真菌的抑制作用；(8)选昆明种小白鼠，做油菜饼抗菌肽提取物的动物急性毒性试验；(9)通过抑菌活性试验和饲料防霉实验检验油菜饼抗菌肽提取物对饲料中霉菌的抑制作用。

2.权利要求1的粗蛋白提取材料，是油菜饼粕。

3.权利要求1的纯化粗蛋白方法，所述硫酸铵沉淀所需的硫酸铵饱和度为60±5％。

4.权利要求1的纯化粗蛋白方法，所述脱盐所需透析液为0.05mol/L的pH 8.0的Tris-HCl缓冲液。

5.权利要求1的纯化粗蛋白方法，所述柱层析材料为Sephadex G-100，洗脱液为0.05mol/L的pH8.0的Tris-HCl缓冲液。

6.权利要求1的供试菌株为玉米赤霉、柑橘绿霉、黑曲霉、黄曲霉。