[发明专利]昆虫小分子活性物质在制备抗动脉粥样硬化的药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及昆虫活性物质领域，具体涉及分子量小于30KD的昆虫小分子活性物质在制备抗动脉粥样硬化的药物中的应用。

背景技术

家蝇的科学名字为Musca domestica Linnaeus，为昆虫纲，双翅目，家蝇科。早在明朝时期，家蝇幼虫就被用于临床治疗脓疱、疖及消化器官的细菌感染等，近年来在多种创伤的治疗中试用广泛。

针对动脉粥样硬化的发病机理中脂类代谢紊乱及脂质侵润学说(Szypula I，Kotulska A，Szopa M，Pieczyrak R，Kucharz EJ.Adiposis dolorosa withhypercholesterolemia and premature severe generalized atherosclerosis.Wiad Lek.2009；62(1)：64-5.)、氧化损伤学说(Dimitrova-Shumkovska J，Veenman L，Ristoski T，Leschiner S，Gavish M.Chronic high fat，high cholesterol supplementation decreases18kDa Translocator Protein binding capacity in association with increased oxidativestress in rat liver and aorta.Food Chem Toxicol.2010 Jan 6.[Epub ahead of print].)、炎症损伤学说(Libinaki R，Tesanovic S，Heal A，Nikolovski B，Vinh A，Widdop RE，Gaspari TA，Devaraj S，Ogru E.The Effect of Tocopheryl Phosphate on KeyBiomarkers of Inflammation：Implication in the reduction of atherosclerosisprogression in a hypercholesterolemic rabbit model，Clin Exp Pharmacol Physiol.2010Jan 17.[Epub ahead ofprint].)等形成的抗动脉粥样硬化研究进展情况如下：针对脂类代谢紊乱及脂质侵润常用的化学药的主要分为4大类：他汀类、胆酸螯合剂类、烟酸类和贝特类等。但这些药物的作用靶点比较单一，不同个体之间存在着不可忽视的差异(ROSES A D.Pharmacogenetics and drug development：the path to safer and more effective drugs[J].Nat Rev Genet，2004；5(9)：645-656.)，同时还存在一定的不良反应。他汀类大剂量服用会产生肌毒和升高肝转氨酶(Rasch A，Schimmer M，Sander CA.Simvastatin-induced dermatomyositis.Hautarzt.2009；60(6)：489-93.)；胆酸螯合剂类可过度干扰脂肪的吸收，可导致脂肪泻，还可影响酸性药物的吸收(Davidson MH，Dillon MA，Gordon B，Jones P.Samuels J，Weiss S，Isaacsohn J，Toth P，Burke SK.Colesevelam hydrochloride(cholestagel)：a new，potent bile acid sequestrant associated with a low incidence ofgastrointestinal side effects.Arch Intern Med.1999；159(16)：1893-900.)；贝特类和烟酸会产生胃肠道不适、肝肾损伤、潮红等过敏性反应等(Adverse effect offenofibrate on branched-chain alpha-ketoacid dehydrogenase complex in rat′sliver.Knapik-Czajka M，Gozdzialska A，Jaskiewicz J.Toxicology.2009；266(1-3)：1-5.)。另外，中医中药在降血脂方面也取得了较好的效果，单味中药如银杏叶(茶薛慧，李玉山，谭志鑫.银杏叶茶对高胆固醇饮食小鼠血脂的影响.中国现代医学杂志，2001，11(4)：53.)、姜黄素(陆红，吕圭源.高脂血症中药治疗的实验研究进展.中药药理与临床，2003，19(3)：45-46.)等，复方中成药如健脾降脂灵(金智生，何建成.健脾降脂灵对高脂血症大鼠血脂的影响.中国中西医结合急救杂志，2002，9(1)：41.)、益气活血方(张秋华，孙文静.益气活血方对大鼠的调节作用与NO水平的影响〔J〕.中国实验方剂学杂志，2003，9(1)：21.)等。氧化损伤在动脉粥样硬化性的血管疾病中扮演重要的角色(Jane A.Leopold，Joseph Loscalzo.Oxidative risk for atherothrombotic cardiovascular disease Free Radical Biology&Medicine xxx(2009)Article in press.)。主要通过调节过氧化作用、诱导血管炎症基因表达、促进局部炎症反应和细胞增殖，多方面参与动脉粥样硬化的发生发展。血浆中氧化修饰低密度脂蛋白(Ox-LDL)可被巨噬细胞、平滑肌细胞和内皮细胞无反馈调节的清道夫受体识别，导致胆固醇大量沉积。Ox-LDL对血管内皮细胞和平滑肌细胞有较强的毒性，还能直接引起血小板的聚积，促进血栓的形成(Terasaka N，Wang N，Yvan-Charvet L，Tall AR.High-density lipoprotein protectsmacrophages from oxidized low-density lipoprotein-induced apoptosis by promotingefflux of 7-ketocholesterol via ABCG1.Proc Natl Acad Sci U S A.2007；104(38)：15093-8.)。氧自由基引起脂质过氧化作用形成的脂质过氧化物丙二醛(MDA)等。MDA可抑制胆固醇从细胞内侧向外侧的移动交换，从而使细胞膜胆固醇增加，流动性降低，导致细胞膜的稳定性和通透性异常(andey KB，RizviSIP.Protective effect of resveratrol on formation of membrane protein carbonyls andlipid peroxidation in erythrocytes subjected to oxidative stress.Appl Physiol NutrMetab.2009；34(6)：1093-7.)。抗氧化治疗常采用维生素C、E和β-胡萝卜素等，但其抗氧化能力较弱；人工合成的普罗布考抗氧化效果较好，但存在胃肠道及心脏不适等副反应(Yamashita S，Matsuzawa Y.Where are we with probucol：a newlife for an old drug？Atherosclerosis.2009；207(1)：16-23.)。炎症损伤作为动脉粥样硬化的重要发病原因，近年来有不少报道(Yamashita S，Matsuzawa Y.Where arewe with probucol：a new life for an old drug？Atherosclerosis.2009；207(1)：16-23.)。随着多种炎性细胞和炎症因子在动脉粥样硬化斑块中的发现，炎症在动脉粥样硬化中的作用引起了广泛的关注。Ross在1999年明确提出“动脉粥样硬化是一种炎症疾病”，认为动脉粥样硬化是各种致病因子造成血管内皮损伤，进而引起的一种慢性炎症性反应，炎性细胞(尤其是巨噬细胞)和炎症因子在动脉粥样硬化的发生发展中起关键性作用(Ross R.Atherosclerosis is an inflammatorydisease.Am Heart J.1999；138(5Pt 2)：S419-20.)。该观点目前已经得到多个实验的支持，研究者认为进入血管壁的巨噬细胞可被氧化型低密度脂蛋白活化，通过NF-κB、iNOS和COX等途径产生TNF-α、IL-1、NO、PGs等多种炎症介质，促进AS的形成和发展(Syrovátka P，Kraml P.Infection and atherosclerosis.VnitrLek.2007；53(3)：286-91.、Mahmoudi M，Curzen N，Gallagher PJ.Atherogenesis：therole ofinflammation and infection.Histopathology.2007；50(5)：535-46.)。TNF-α是巨噬细胞分泌的炎症因子之一，Campbell等发现TNF-α基因敲除可以抑制动脉粥样硬化斑块的形成，提示了TNF-α在动脉粥样硬化中的重要作用(CampbellLA，Nosaka T，Rosenfeld ME，et al.Tumor necrosis factor alpha plays a role in theacceleration of atherosclerosis by Chlamydia pneumoniae in mice.Infect Immun.2005；73(5)：3164-5.)。NO和PGE分别是巨噬细胞活化后通过诱导型一氧化氮合酶(iNOS)途径或环氧化酶-2途径(COX-2)产生的重要炎症介质，敲除iNOS基因(Chesebro BB，Blessing E，Kuo CC，et al.Nitric oxide synthase plays a role inChlamydia pneumoniae-induced atherosclerosis.Cardiovasc Res.2003；60(1)：170-4.)或COX-2(Burleigh ME，Babaev VR，Yancey PG，et al.Cyclooxygenase-2promotesearly atherosclerotic lesion formation in ApoE-deficient and C57BL/6mice.J MolCell Cardiol.2005；39(3)：443-52.)基因，减少NO或PGE的生成，可以减轻动脉粥样硬化病变程度。单核-巨噬细胞分泌的TNF-α等炎症介质和基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs)还与动脉粥样硬化斑块的不稳定性密切相关。减少斑块中巨噬细胞数目、降低炎症因子和MMPs的表达可以增加斑块的稳定性，目前认为MMP-2和MMP-9与动脉粥样硬化关系最密切(Rouis M.Matrix metalloproteinases：a potential therapeutic target in atherosclerosis.Curr DrugTargets Cardiovasc Haematol Disord.2005；5(6)：541-8.)。能引起动脉粥样硬化炎症反应的危险因素除氧化型低密度脂蛋白外，还包括多种致病微生物，如肺炎衣原体、巨细胞病毒和革兰氏阴性菌。研究证明革兰阴性菌及其LPS可以通过TLR2或TLR4信号活化巨噬细胞，促进动脉粥样硬化的形成(Madan M，Amar S.Toll-like receptor-2 mediates diet and/or pathogen associated atherosclerosis：proteomic findings.PLoS ONE.2008；3(9)：e3204.)。他汀类药物和环氧化酶抑制剂阿司匹林可以通过降低炎症反应改善动脉粥样硬化病变程度，证实了抗炎在动脉粥样硬化治疗中的作用(Mahmoudi M，Curzen N，Gallagher P J.Atherogenesis：the role of inflammation and infection.Histopathology.2007；50：535-46.)。综上所述，炎症贯穿了动脉粥样硬化从脂纹形成到斑块破裂的全过程，以抗炎为手段开发治疗动脉粥样硬化的新方法值得深入研究。