[发明专利]用于制备L-乳酸的凝结芽孢杆菌及其应用方法

权利要求书

1.一种用于制备L-乳酸的凝结芽孢杆菌，其特征在于，具体为凝结芽孢杆菌(B.coagulans)XZL4和XZL9，其中：

所述的凝结芽孢杆菌(B.coagulans)XZL4DSM No.23183为革兰氏阳性菌，其16S rRNA基因的核苷酸序列如Seq.ID No.1所示；

所述的凝结芽孢杆菌(B.coagulans)XZL9DSM No.23184为革兰氏阳性菌，其16S rRNA基因的核苷酸序列如Seq.ID No.2所示。

2.一种根据权利要求1所述的用于制备L-乳酸的凝结芽孢杆菌的应用方法，其特征在于，以含有五碳糖或六碳糖或其组合的农业和工业产品和废弃物作为发酵培养基的碳源，进行发酵后得到L-乳酸。

3.根据权利要求2所述的用于制备L-乳酸的凝结芽孢杆菌的应用方法，其特征是，所述的发酵是指采用发酵培养基按10％体积比的接种量在50℃～60℃环境下培养48～72小时。

4.根据权利要求2或3所述的用于制备L-乳酸的凝结芽孢杆菌的应用方法，其特征是，所述的发酵中包含补料流加工艺，该补料流加工艺是指：当发酵液中总还原糖含量低于20～30g/L时补加碳源，使总还原糖含量维持在30～70g/L，或达到50～70g/L。

5.根据权利要求2所述的用于制备L-乳酸的凝结芽孢杆菌的应用方法，其特征是，所述的发酵培养基的组分及其含量为：碳源40～200g/L、氮源5～12g/L和用于调控培养基pH的中和剂50～100g/L，余量为水。

6.根据权利要求2所述的用于制备L-乳酸的凝结芽孢杆菌的应用方法，其特征是，所述的碳源为以五碳糖或六碳糖或其组合为有效组分的葡萄糖、木糖或农业和工业废弃物，其中：葡萄糖浓度为40～150g/L，木糖浓度为40～100g/L，木糖醇生产副产物浓度为100～200g/L。

7.根据权利要求2所述的用于制备L-乳酸的凝结芽孢杆菌的应用方法，其特征是，所述的芽孢杆菌的种子培养液是指：将芽孢杆菌(B.coagulans)XZL4DSM No.23183和XZL9DSM No.23184依次进行斜面培养和种子培养后获得的培养物。

8.根据权利要求7所述的用于制备L-乳酸的凝结芽孢杆菌的应用方法，其特征是，所述的斜面培养是指：将凝结芽孢杆菌(B.coagulans)XZL4DSM No.23183和XZL9DSM No.23184菌种接种于含有15g/L琼脂的固体斜面培养基上，50～60℃条件下，培养24～48小时。

9.根据权利要求7所述的用于制备L-乳酸的凝结芽孢杆菌的应用方法，其特征是，所述的种子培养是指：将经过斜面培养的芽孢杆菌在无菌条件下接种到30ml种子培养基中，50～60℃条件下，静止培养10～24小时，加入中和剂控制发酵液pH，制得种子培养液。

10.根据权利要求9所述的用于制备L-乳酸的凝结芽孢杆菌的应用方法，其特征是，所述的种子培养基每升中含有：葡萄糖40～60g，酵母粉5～10g，CaCO₃ 20～40g，余量为水；该种子培养基的pH为6.5。