[发明专利]胆甾化壳聚糖纳米载体及其载药纳米粒子和制造方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种选择性胆甾化壳聚糖纳米载体及其载药纳米粒子和制造方法。

背景技术：

作为新型药物输送和控缓释载体，可生物降解聚合物的纳米粒子，特别是基于多糖的纳米粒子，因其具有良好的生物相容性、超微尺寸、合理的体内分布和高效的药物利用率，近年来日益受到广泛关注。可生物降解聚合物纳米粒子不仅可增强药物的稳定性、提高疗效、降低毒副作用，而且由于EPR效应(Enhanced Permeability and Retention Effect)能在肿瘤病变部位富集，实现对肿瘤组织的“被动靶向”，是包埋抗癌药物、多肽、蛋白质、核酸、疫苗和基因的理想载体。

壳聚糖(chitosan，CS)是一类由2-氨基-2-脱氧-D-葡萄糖通过β-1，4糖甙键连接而成的带正电荷的直链共聚物，是天然多糖中唯一的碱性多糖，来源丰富，其年产量仅次于纤维素。壳聚糖具有良好的生物相容性、生物可降解性、抗菌性和无毒性等特点，已被广泛应用于生物、医药、化工、食品、纺织、农业等领域。然而，由于壳聚糖的结晶性较高，溶解性较差，仅能溶于稀酸性水溶液和特殊的含卤素的有机溶剂中，大大限制了壳聚糖的应用。因此，对壳聚糖进行化学改性，提高其溶解性，扩大其应用领域是壳聚糖研究的一个重要方向。由于壳聚糖分子中含有羟基、氨基等功能基团，因此，在适当条件下可对其进行多种化学修饰，如酰基化、羧甲基化、烷基化、酯化、醚化、交联和接枝共聚等反应。

近年来，由化学改性的两亲性壳聚糖制备纳米粒子受到人们的广泛关注。目前，大部分研究集中于壳聚糖氨基的修饰改性以及该类衍生物纳米粒子的制备和应用方面(Liu CG，et al：J.Agric.Food Chem.，2005，53：437-441)，而有关对其羟基进行化学改性的壳聚糖衍生物制备纳米粒子的研究报道则较少。壳聚糖的游离氨基具有重要的生物学特性和阳离子聚合物特点(Liu L，et al：Carbohyd.Polym.，2005，60：351-356)，保留壳聚糖的游离氨基可进行进一步的化学修饰或交联；胆甾醇作为生物内源性物质，对于维持正常的细胞功能和新陈代谢起了重要作用，是体内多种激素合成不可缺少的重要原料。迄今为止，对壳聚糖进行选择性胆甾化，并制备该壳聚糖衍生物纳米粒子作为药物载体的研究尚未见报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种选择性胆甾化壳聚糖纳米载体及其载药纳米粒子和制造方法。由本发明方法制备的纳米载体，可增强药物的靶向性和稳定性、提高药物缓释性、降低药物的毒副作用，且其制备过程简单、价廉易得，克服了现有载体的一些不足。本发明制备的选择性胆甾化壳聚糖载药纳米粒子，载药量高，缓释性能好，既提高了药物的溶解性，又降低了药物在体内的毒副作用，是一种较好的药物载体材料。

本发明提供一种选择性胆甾化壳聚糖纳米载体是以胆甾醇、琥珀酸酐和邻苯二甲酸酐、壳聚糖为原料，制备出胆甾醇琥珀酸酯(CHS)和邻苯二甲酰化壳聚糖(PHCS)，二者再进行反应制备，粒径为100～200nm，胆甾醇/琥珀酸酐的摩尔比为1～30∶3～90；壳聚糖/邻苯二甲酸酐的摩尔比为1～60∶3～180。

本发明提供一种选择性胆甾化壳聚糖纳米载体的制备方法包括的步骤：

1)胆甾醇琥珀酸酯(CHS)的合成：将胆甾醇与琥珀酸酐溶解于吡啶中，反应液于室温下搅拌反应48～96h，倾入冰盐酸溶液，过滤，于乙酸乙酯/乙醇体系重结晶，其中，胆甾醇/琥珀酸酐的摩尔比为1∶3，盐酸/冰水的体积比为1∶10～20，乙酸乙酯/乙醇体积比为1∶0.5～1。

2)邻苯二甲酰化壳聚糖(PHCS)与胆甾醇琥珀酸酯(CHS)接枝共聚物的合成：将壳聚糖与邻苯二甲酸酐分散于N，N’-二甲基甲酰亚胺(DMF)或二甲基亚砜(DMSO)，氮气保护下100～120℃反应7～8h，即得PHCS；将CHS与PHCS溶解于DMF或DMSO，在N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)与碳二亚胺类活化剂作用下反应48～96h，其中，壳聚糖/邻苯二甲酸酐的摩尔比为1∶3，PHCS/CHS的摩尔比为10∶1～5，CHS/NHS/碳二亚胺的摩尔比为1∶1～1.5∶1～1.5。

所述壳聚糖的分子量为50000～200000，脱乙酰度为70～99％。

所述碳二亚胺类活化剂选自：1-乙基-(3-甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDC·HCl)、N，N’-二环己基碳二亚胺(DCC)或N，N’-二异丙基碳二亚胺(DIC)。