[发明专利]一种新型壳聚糖纳米颗粒及其制备方法

权利要求书

1.一种新型壳聚糖-酪蛋白磷酸肽纳米颗粒的制备方法，其特征是壳聚糖与酪蛋白磷酸肽的质量比为1/5，粒径为100-200nm，Zeta电位为0-30mV。

2.一种新型壳聚糖-酪蛋白磷酸肽纳米颗粒的制备方法，通过离交联反应在室温下合成，其特征是：(1)壳聚糖溶于1％的醋酸溶液；(2)将酪蛋白磷酸肽以去离子水溶解后，调节溶液pH为6；(3)搅拌条件下，在酪蛋白磷酸肽溶液中逐滴滴加壳聚糖溶液，使酪蛋白磷酸肽与壳聚糖互相交联，形成纳米颗粒，此时溶液呈现乳光。

3.根据权利要求2所述的壳聚糖-酪蛋白磷酸肽纳米颗粒的制备方法，其特征是壳聚糖的醋酸溶液在使用前要加碱调节pH至6。

4.根据权利要求2所述的壳聚糖-酪蛋白磷酸肽纳米颗粒的制备方法，其特征是壳聚糖是市售产品，分子量为100kDa，脱乙酰度为90％。

5.根据权利要求2所述的壳聚糖-酪蛋白磷酸肽纳米颗粒的制备方法，其特征是所用的酪蛋白磷酸肽是酪蛋白以胰蛋白酶水解后经等电点沉淀及阴离子交换树脂纯化后的富含磷酸基团的多肽。

6.根据权利要求5所述的酪蛋白磷酸肽的制备方法，其特征是：酪蛋白以1∶10(w/v)溶于0.05M的NaOH溶液，调节pH至8.0。加入33％(w/v)胰蛋白酶水溶液，胰蛋白酶与酪蛋白质量比为1∶200，50℃水浴恒温反应，并且不断以1M的NaOH溶液调节水解液的pH，使水解液的pH恒定g.0。当水解液的pH最后一次调回8.0后，保持半小时以上不再变化时，认为反应结束。反应结束后，以沸水浴5min灭酶。水解液温度回到室温后，用1M的HCl将水解液的pH调至4.6，以2000r/min离心30min，取上清液，即为CPP粗提产物。调节CPP初产物pH值至pH8.9，通过HiPrep column(16/10 QXL，Amersham Biosciences)阴离子交换柱分离纯化CPP，冻干后得到富含磷酸基团的酪蛋白磷酸肽。

7.根据权利要求2所述的壳聚糖-酪蛋白磷酸肽纳米颗粒的制备方法，其特征是酪蛋白磷酸肽用去离子水复溶后，要调节pH值至6。

8.根据权利要求2所述的壳聚糖-酪蛋白磷酸肽纳米颗粒的制备方法，其特征是壳聚糖与酪蛋白磷酸肽的最终质量比为1/5，且溶液呈现乳光。