[发明专利]一种具有抗炎活性的三萜类化合物

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，是从中药金樱叶中提取分离得到的7个新的具有抗炎活性的三萜类化合物。

背景技术

金樱叶为蔷薇科蔷薇属植物金樱子(Rosa laevigata Michx.)的嫩叶。在我国分布很广，主要分布于华东、中南、西南等地区。金樱叶为民间常用中药，是古方“军中一捻金”的主要成分之一，主治金疮出血。已从金樱叶中提取到三萜类化合物乌苏酸、蔷薇酸、坡模酸、齐墩果酸、山楂酸、等三萜酸类活性成分和金樱子皂苷A、野蔷薇苷、委陵菜酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷等三萜皂苷类活性成分，它们的化学结构通式如下：

其中，R₁表示氢或羟基，R₂表示氢或羟基，R₃表示氢或吡喃葡萄糖基，R₄表示氢或甲基，R₅表示氢或羟基，R₆表示氢或甲基，R₇表示甲基或羟甲基。但至今未见本发明提供的从金樱叶中分离得到的7个新的具有抗炎活性的三萜类化合物的报道。

发明内容

本发明提供一种从中药金樱叶中分离得到的新的具有抗炎活性的7个三萜类化合物，它们的化学结构式分别如下：

经体外抗炎活性试验，它们均能显著抑制脂多糖(LPS)引起的293-nfkb细胞中荧光素酶表达，且呈现剂量依赖关系，表明具有明显的抗炎活性。因此，可用于制备新的抗炎药物。

本发明化合物的制备方法如下：

1.制备金樱叶提取物

将中药金樱叶按常规用40～95％乙醇水溶液浸泡过夜，加热回流提取2～3次，每次1～3小时，合并提取液，减压回收溶剂，得提取物浸膏；

2.提取三萜类化合物

将浸膏加水溶解，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，分别得到石油醚和乙酸乙酯萃取液，取乙酸乙酯萃取液，减压回收溶剂，得乙酸乙酯部位粉末；

3.分离纯化

将乙酸乙酯部位粉末按常规上硅胶减压柱色谱，用二氯甲烷-甲醇系统以50∶1-20∶1-10∶1-5∶1-1∶1进行梯度洗脱，共收集洗脱液20份，每份2000ml，将12-16份合并，减压回收溶剂后再次上硅胶减压柱色谱，用石油醚-丙酮系统以20∶1-10∶1-5∶1-1∶1进行梯度洗脱，共收集洗脱液10份，每份2000ml，将5-7份合并，减压回收溶剂后再用反相ODS填料开放柱进行柱色谱分离，用甲醇-水梯度洗脱，分别取60％甲醇-水洗脱部分，减压回收溶剂后进行反相高效液相，用70％甲醇-水洗脱，分离得到化合物1，化合物2，化合物3；取70％甲醇-水洗脱部分，减压回收溶剂后进行反相高效液相，用75％甲醇-水洗脱，分离得到化合物7；取80％甲醇-水洗脱部分，减压回收溶剂后进行反相高效液相，用85％甲醇-水洗脱，分离得到化合物4，化合物5，化合物6。

具体实施方式

现结合实施例，对本发明作详细描述。

实施例1.制备本发明三萜类化合物1～7

1.制备金樱叶提取物

取中药金樱叶2公斤，用10倍体积量的70％乙醇水溶液浸泡过夜，加热回流提取3次，每次2小时，合并提取液，减压回收溶剂，得金樱叶提取物浸膏；

2.提取三萜类化合物

将浸膏加水溶解，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，分别得到石油醚和乙酸乙酯萃取液，取乙酸乙酯萃取液，减压回收溶剂，得乙酸乙酯部位粉末；

3.分离纯化

将乙酸乙酯部位粉末按常规上硅胶减压柱色谱，用二氯甲烷-甲醇系统以50∶1-20∶1-10∶1-5∶1-1∶1进行梯度洗脱，共收集洗脱液20份，每份2000ml，将12-16份合并，减压回收溶剂后再次上硅胶减压柱色谱，用石油醚-丙酮系统以20∶1-10∶1-5∶1-1∶1进行梯度洗脱，共收集洗脱液10份，每份2000ml，将5-7份合并，减压回收溶剂后再用反相ODS填料开放柱进行柱色谱分离，用甲醇-水梯度洗脱，分别取60％甲醇-水洗脱部分，减压回收溶剂后进行反相高效液相，用65％甲醇-水洗脱，分离得到化合物1 20mg，化合物2 15mg，化合物3 15mg；取70％甲醇-水洗脱部分，减压回收溶剂后进行反相高效液相，用75％甲醇-水洗脱，分离得到化合物7 30mg，取80％甲醇-水洗脱部分，减压回收溶剂后进行反相高效液相，用85％甲醇-水洗脱，分离得到化合物4 13mg，化合物5 25mg，化合物6 20mg。

经核磁共振检测分析，确定本发明各化合物的化学结构，它们的理化性质和波谱数据分别为：