[发明专利]一类交链孢菌生物碱及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种交链孢菌，其特征是由苔草叶片分离纯化获得。菌落深绿色至黑色，菌丝淡色，生长迅速；分生孢子梗暗色，单枝，长短不一，顶生不分枝或偶尔分枝的孢子链；分生孢子暗色，有纵横隔膜，倒棍棒形、椭圆形或卵形，常形成链，顶端有喙状的附属丝。经宋勇春副教授鉴定为交链孢属，现保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏地址：武汉市武昌珞珈山武汉大学内，专利菌种保藏编号为CCTCC NO.M 2010064，保藏日期为2010年3月27日。

2.根据权利要求1所述交链孢菌制备的交链孢菌生物碱，其特征是具有下述结构通式：

其中1，2，3，3a，4，5，5a，6，7，8，9，9a，9b，10为碳原子序数编号，4为氮原子序数编号。

3.根据权利要求2所述交链孢菌生物碱的制备方法，其特征是：

在PDA平板培养基中活化的苔草叶片交链孢属真菌的菌丝体接种于20瓶PD培养基中每瓶300mL，在28℃、150rpm旋转式摇床上振荡培养6天，将发酵液接种于400瓶小米固体培养基中，每瓶15mL菌液，接种后的固体培养基在28℃下静置培养30天；所得的固体培养物干燥、磨碎后称重，得2000克固体；将固体培养物用3L的氯仿/甲醇混合溶剂，体积比1∶1，提取5次，将提取液浓缩，得粗浸膏F1；将粗浸膏F1用适量的甲醇溶解，然后把溶液置于-4℃的冰箱过夜，过滤除去析出的蜡状固体，将滤液减压浓缩，得浸膏F2；对浸膏F2进行硅胶柱层析，先用10倍体积的氯仿洗脱，得浸膏F3；然后用体积比为100/1的氯仿/甲醇混合溶液继续对浸膏F2进行洗脱，合并白色部分洗脱液得白色浸膏F4；对浸膏F4，用体积比1/1的氯仿/甲醇凝胶柱层析得到左旋交链孢菌生物碱。

4.根据权利要求2所述交链孢菌生物碱的化学合成方法，其特征是由以下步骤构成：

1)以3，5-二甲氧基苯胺为原料，通过两步反应制得中间体A：2-氨基-4，6-二甲氧基苯甲酸，

2)再以3-甲基环戊酮为原料，通过邻位氯代然后氧化两步反应生成中间体B：4-甲基-1，2-环戊二酮，

3)将中间体A通过重氮化反应生成相应的重氮盐，再加入中间体B即可生成3环的内酯C，

4)在甲酰胺存在的情况下，通入氨气，将化合物C转化为3环内酰胺D，

5)再通过对化合物D进行选择性脱甲基，得外消旋化合物交链孢菌生物碱[(±)-alternarlactam]，

6)对浸外消旋交链孢菌生物碱[(±)-alternarlactam]，用手性高压液相色谱法，手性柱：Chiralpak AD-H column；流动相：甲醇/二乙醇胺体积比为100/0.1，流速：1.0mL/min分离得到一对对应异构体左旋交链孢菌生物碱[(-)-alternarlactam]和右旋交链孢菌生物碱[(+)-alternarlactam]。

5.根据权利要求2所述的交链孢菌生物碱在制备抗肿瘤药物中的应用。