[发明专利]一种抗菌肽plectasin的高效生产方法及应用无效
申请号: | 201010181259.2 | 申请日: | 2010-05-18 |
公开(公告)号: | CN101870986A | 公开(公告)日: | 2010-10-27 |
发明(设计)人: | 黄毓茂;刘德辉;何俊 | 申请(专利权)人: | 华南农业大学 |
主分类号: | C12N15/81 | 分类号: | C12N15/81;C12N1/19;C07K14/47;A61K38/16;A61P31/04;A23K1/16;A23L3/3526 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 林丽明 |
地址: | 510642 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 抗菌 plectasin 高效 生产 方法 应用 | ||
1.一种抗菌肽plectasin的高效生产方法,其特征在于通过构建pGAPZαA-plectasin真核表达载体转化宿主细胞毕赤酵母,构建表达工程菌,发酵培养表达工程菌后将表达培养基离心处理得到的上清液即纯化得到抗菌肽plectasin。
2.根据权利要求1所述抗菌肽plectasin的高效生产方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)将编码plectasin的DNA序列克隆到载体pGAPZαA上,构建pGAPZαA-plectasin重组表达载体;
(2)将重组表达载体pGAPZαA-plectasin转化宿主细胞毕赤酵母SMD1168,构建重组酵母基因工程菌;
(3)发酵培养重组酵母菌,进行表达;
(4)将表达培养基离心处理,取上清液即得纯化的抗菌肽plectasin。
3.根据权利要求2所述抗菌肽plectasin的高效生产方法,其特征在于步骤(3)是将筛选的具有Zeocin抗性的单菌落于的YPD液体培养基中进行一级培养,至OD600=2~6,此时细胞处于对数生长期;取一级培养液,重悬于YPD中,继续振荡培养72~120小时。
4.根据权利要求2所述抗菌肽plectasin的高效生产方法,其特征在于步骤(4)是将表达培养基于3000~5000r/min下离心,取上清液即为纯化得到的抗菌肽plectasin。
5.一种权利要求1所述方法制备得到的抗菌肽plectasin的应用,其特征在于应用于制备抗金黄色葡萄球菌或猪源链球菌药物方面。
6.一种权利要求1所述方法制备得到的抗菌肽plectasin的应用,其特征在于应用于制备饲料添加剂或防腐剂。
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