[发明专利]2-庚基-5-己基呋喃-3-羧酸及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及的是一种生物工程技术领域的有机物及其制备方法，具体是一种2-庚基-5-己基呋喃-3-羧酸及其制备方法。

背景技术

由Rhizoctonia solani引起的纹枯病是最重要的水稻病害之一，引起的产量损失可达到20％～40％。目前我国水稻纹枯病的防治完全依赖于井岗霉素，井岗霉素对控制纹枯病的蔓延与危害是相当有效的。参见《井岗霉素防治水稻纹枯病试验初报》。但是井岗霉素已使用了30多年，使用井岗霉素防治纹枯病的药量不断提高，现每年使用次数已从30年前的2次增加到目前的3～4次，使用量也已从以前的1.5kg/hm2增加到目前的4.5～6.0kg/hm2。长期使用单一井岗霉素防治水稻纹枯病易导致R.solani产生抗药性这个问题已引起国内外有关专家的高度关注。因此，用植物根际促生细菌发酵物来防治水稻纹枯病是一种很有应用前景的探索。

植物根际促生细菌(Plant Growth Promoting Rhizobacteria，PGPR)是当前农业微生物的研究热点之一。PGPR能通过多种方式促进植物生长，最重要的方式是分泌抗病物质抑制土壤中植物病原菌繁殖，控制植物病害发生。假单胞菌是其中典型代表，其生物防治的机理目前多认为是它可以分泌一种或几种抗生物质来抑制病原菌的生长，从而实现其生物防治的作用。

发明内容

本发明针对现有技术存在的上述不足，提供一种2-庚基-5-己基呋喃-3-羧酸及其制备方法，通过简单步骤实现从假单胞菌SJT25发酵液制备得到对水稻纹枯病具有抗性的天然有机物2-庚基-5-己基呋喃-3-羧酸，具有应用于生物农药的前景。

本发明是通过以下技术方案实现的：

本发明涉及2-庚基-5-己基呋喃-3-羧酸(2-heptyl-4-hexylfuran-3-carboxylic acid)具有如下化学结构：

本发明涉及上述2-庚基-5-己基呋喃-3-羧酸的制备方法，包括以下步骤：

第一步、发酵：将假单胞菌株SJT25接种到KMB培养基、PPM培养基或PDA培养基中培养，得到发酵液；

所述的培养是指：培养温度为25-32℃，摇床转速为80-280rpm。

第二步、提取：将发酵液用乙酸乙酯或氯仿萃取，将萃取得到的有机相旋转蒸发并浓缩后得到浸膏；

所述的旋转蒸发是指：旋蒸温度为25-60℃。

第三步、分离纯化：将浸膏溶解于甲醇中，通过反相柱分离纯化后以流动相进行梯度洗脱，最后收集单峰得到2-庚基-5-己基呋喃-3-羧酸。

所述的反相柱分离纯化是指：采用制备型高效液相ODS RP-C18反相柱进行以下两种方式中的任意一种进行分离纯化：

a)设定流速为3ml/min，检测波长205nm，出峰时间为49.5min，流动相：0-20min，20％-75％甲醇；20-40min，75％甲醇；40-45min，75-100％甲醇；45-66min，100％甲醇。

b)设定流速为3ml/min，检测波长205nm，出峰时间：28.4min，流动相：0-30min，20％-100％甲醇；30-40min，100％甲醇。

所述的流动相是指甲醇和水的混合溶液。

所述的假单胞菌株SJT25：

拉丁学名为：Pseudomonas putida SJT25，

生物保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心

地址：北京市朝阳区北辰西路1号院中国科学院微生物研究所

保藏号：CGMCC3656

本发明提供了一种制备天然有机物的简便方法，原料易得，为大规模工业自动化生产提供了可能。本发明的新颖有机化合物2-庚基-5-己基呋喃-3-羧酸，经抗性实验，证实具有明显的抗水稻纹枯病菌活性，有望应用于水稻纹枯病的防治，对于开发相关抗植物病原菌生防农药具有潜在的重要意义。

附图说明

图1分离纯化方法一所得2-庚基-5-己基呋喃-3-羧酸的制备液相色谱图，图中箭头所指C即为2-庚基-5-己基呋喃-3-羧酸色谱峰。

图2分离纯化方法二所得2-庚基-5-己基呋喃-3-羧酸的制备液相色谱图，图中箭头所指C即为2-庚基-5-己基呋喃-3-羧酸色谱峰。

图3提取粗品对水稻纹枯病菌抗性结果，其中：a为空白PDA氯仿提取物对照，b为空白KMB乙酸乙酯提取物对照，c为SJT25的PDA发酵液经氯仿提取粗品，d为SJT25的KMB发酵液经乙酸乙酯提取粗品，中间指示菌为水稻纹枯病菌。