[发明专利]一种提取二十二碳六烯酸油脂的方法

说明书

技术领域

本发明属于油脂技术领域，涉及一种提取二十二碳六烯酸油脂的方法。

背景技术

DHA(Docosahexaenoic acid，22：6Δ4.7.10.13.16.19，全名二十二碳六烯酸)是一种 重要的n-3系长链多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acid，简称PUFA)，具有增强 智力，促进脑细胞发育，治疗心脑血管疾病等作用，被誉为新一代功能保健因子，广泛 应用于婴幼儿食品添加剂和医药行业。

传统的DHA来源主要为鱼油，但由于受到鱼的种类、季节、地理位置等因素的限 制使得鱼油生产的DHA油脂成分等不稳定、品质也不高。因此，微生物发酵法制备DHA 工艺受到广泛关注。国内外许多企业均已成功的实现了微生物发酵产DHA油脂的工业 生产，但是生产工艺大多比较传统。

由于发酵液中存在大量的水，造成萃取过程中消耗大量的乙醇和有机溶剂，因此萃 取前的分水是毛油提取的过程中的一个非常重要的步骤。工业上常用的分水方法为添加 絮凝剂剂，如明矾、硫酸铝、无水CaCl₂、三氯化铁、聚合氧化铝、聚合硫酸铁或聚丙 烯酰胺等，然后经过静置、过滤、离心或烘干等程序。但是这些方法或需要较长的时间 (一般需要放置12h以上，降低了生产效率)或耗费较大的能量(离心机等属于耗材， 远转耗能，设备的投入和维护也需要成本，烘干则需要更大能耗)，对于工业生产来说 不够经济。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种提取二十二碳六烯酸油脂的方法。该方法是 基于酶法破壁提取DHA油脂的方法，能够大大降低生产过程的能耗并节约成本。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：

一种提取二十二碳六烯酸油脂的方法，将含有二十二碳六烯酸的发酵液经酶法破壁 后，先进行一级分水，对菌体进行富集，再进行二级萃取，蒸发除去萃取溶剂后得到粗 油；

其中，

所述的一级分水为，将破壁后的发酵液、乙醇和有机溶剂按体积比1∶0.5～1.5∶0.1～0.8 混合、静置，弃下层水相；通过静置，所得混合液会快速分层，下层为水相，上层为有 机相以及菌体，如果静置时间加长，溶液将会分为三层，从上到下分别为有机溶剂层、 菌体层和水层，只要除去下层水相即可，保留上层的混合物料或者上层有机溶剂层及中 层菌体层；

所述的二级萃取为，将一级分水得到的上层油相(即弃去水相的部分)、乙醇和有 机溶剂按体积比1∶0.6～1.2∶0.6～1.2混合、静置，收集上层有机相；通过静置，混合液 会分层，上层为有机相，中间层为菌体，下层为包含少量残留发酵液的乙醇相；

一级分水和二级萃取中所述的有机溶剂为环己烷、正己烷、乙酸乙酯、丙酮、石油 醚、乙醚、甲苯、氯仿、四号溶剂和六号溶剂中的任意一种或几种的任意比例的混合物。 优选正己烷、丙酮或石油醚。一级分水和二级萃取所使用的有机溶剂相同。

其中，所述的发酵液为由破囊壶菌、裂殖壶菌、隐甲藻或双鞭甲藻经过发酵得到的 含有二十二碳六烯酸的发酵液，本发明方法对发酵使用的菌种和采用的发酵方法并没有 任何限制，只要是有能力发酵生产DHA的菌株都可以使用，只要是能够发酵生产出DHA 的方法都可以使用。当然，通过优化条件，使得发酵液中富含DHA，这种富含DHA的 发酵液更适合用本发明方法进行二十二碳六烯酸油脂的提取。

其中，所述的酶法破壁为使用蛋白酶、溶菌酶、葡聚糖酶、纤维素酶、几丁质酶、 甘露糖酶或半纤维素酶等进行破壁。本发明方法对破壁的酶无任何限制，只要是能将菌 株细胞壁进行破碎的破壁酶都可以使用，本发明方法对破壁的方法也没有任何限制，只 要是利用酶将菌株细胞壁进行破碎的方法都可以使用。

其中，所述的一级分水中，破壁后的发酵液、乙醇和有机溶剂体积比优选为1∶ 0.6～1.3∶0.2～0.6。

其中，所述的一级分水中，破壁后的发酵液、乙醇和有机溶剂混合过程中伴随搅拌， 搅拌时间为5min～3h。搅拌的目的是为了促进物料的混合均匀，实现有机溶剂的部分萃 取功能，本发明方法对混合搅拌的速度无任何限制，以物料混合均匀为前提搅拌一段时 间即可。

其中，所述的一级分水，静置时间为5分钟以上，本发明对静置时间无任何限制， 以实现分层为准，可适当的考虑工作时间安排。