[发明专利]一种综合提取明党参多糖和氨基酸的方法无效
申请号: | 201010182944.7 | 申请日: | 2010-05-26 |
公开(公告)号: | CN101955547A | 公开(公告)日: | 2011-01-26 |
发明(设计)人: | 刘东锋;郭琴;杨成东 | 申请(专利权)人: | 南京泽朗医药科技有限公司 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00;C07C227/40;C07C229/00;A61P37/04;A61P39/00;A61P11/14;A61P11/06 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 综合 提取 明党参 多糖 氨基酸 方法 | ||
技术领域:
本发明属于中药领域,涉及一种综合提取明党参多糖和氨基酸的方法。
背景技术:
明党参为伞形科植物明党参Changium smyrnioides Wolff的干燥根。用于“补肺气,通下行”(《本草从新》);“养血生津,清热解毒”(《本草求原》);“温脾,化痰湿,平肝风”(《饮片新参》)。明党参多糖和氨基酸为其活性成分,在药效上发挥着重要的作用。研究表明,明党参及其多糖具有一定的扶正固本、增强免疫和适应原样作用,在防治癌症和感染等疾病上有潜在的应用价值。明党参可以增强剂调节免疫功能,具有滋补强壮作用,并能降血脂,保肝利胆,镇咳祛痰。明党参水煎液及多糖可显著延长氰化钾中毒小鼠的生存时间,能对抗化学性缺氧,延长小鼠高温环境存活时间,提高抗高温能力。灌服明党参水提液及明党参根中提得的天门冬酰胺均可极显著增加小鼠气管酚红的排泄量,可明显促进蛙纤毛运动,并可极显著抑制氨水喷雾引起的咳嗽次数,对2%氯化乙酰胆碱和0.2%磷酸组织胺引喘的豚鼠哮喘有显著的抑制作用。明党参多糖及水体也均能增加正常小鼠胸腺和脾脏的重量。可使小鼠碳粒廓清速率明显提高,促进网状内皮系统的吞噬功能。还可真高正常小鼠白细胞中暑及淋巴细胞数,并可对抗氢化可的松所致白细胞总数和淋巴细胞数减少。增加外周血ANAE+淋巴细胞阳性百分率。由此可见明党参具有广阔的开发前景,因此,对明党参多糖和氨基酸进行提取分离纯化具有重要意义。
当前提取、纯化明党参多糖技术,主要由以下几种:1)95%乙醇提取,残渣水提,减压浓缩水煎液,冷藏、离心,沉淀物经乙醇、丙酮、乙醚处理后真空干燥,水溶,三氯醋酸除蛋白,透析,透析液减压浓缩、离心、DEAE-纤维素柱层析等(王亚淑等发表的“分析测定明党参多糖的分离、纯化及其理化性质”)。2)水提醇沉,经酶法和Sevag法脱淀粉、果胶和蛋白质,透析后上Sepharose-4B柱分离(张林维,吴东儒,赵帜平,等.药用植物明党参多糖的研究[J].安徽大学学报(自然科学版),1996,20(3):95-100.)。3)石油醚、95%乙醇回流提取,残渣再用水提,Sevage法除蛋白,加醇至含醇量为80%,冷藏(杜清,秦民坚,郭巧生.明党参多糖提取工艺研究[J].现代中药研究与实践,2005,19(4):51-53.)。上述方法存在步骤复杂且成本高,制备量小,多糖活性低等问题。由于上述提取纯化技术所存在的问题,因此需要进行改进。
发明内容:
1、发明目的:本发明的目的就在于提供一种适用于工业生产、综合提取明党参多糖和氨基酸的方法。
2、技术方案:
一种综合提取明党参多糖和氨基酸的方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)提取:将明党参根洗净,切薄片,用8-12倍热水浸泡,加热煮沸提取2-3小时,过滤,保留滤液;残渣加入4-8倍量的0.1-0.5mol/LHCl溶液,于30-50℃恒温提取0.5-1小时,过滤,重复上述操作1-2次,合并滤液;
(2)离子树脂分离:将上述滤液通过阳离子交换树脂,先用去离子水洗脱,将洗脱液A加入70-95%食用乙醇,滤出沉淀,加丙酮洗涤,干燥即得明党参多糖;再用氨水洗脱,收集洗脱液B,备用;
(3)乳状液的制备:按膜溶剂食用油:表面活性剂Span 80:磷酸酯载体的体积比=(30-50)∶(2-10)∶(2-8)进行混合,在混合物中按(1-5)∶1体积比加入浓度为0.2-0.5mol/L的盐酸溶液,在5000-15000r/min搅拌2-5min,制得稳定的W/O型乳状液;
(4)氨基酸的纯化:将洗脱液B调pH至2-5,与乳状液按照一定的体积比(10∶1-10∶4)加入提取器中,在100-500r/min低速搅拌提取5-15min,将乳状液转入分液漏斗中静置分层,分出乳状液,水浴加热破乳后分出油层,将所得水相真空冷冻干燥即得明党参氨基酸。
步骤(1)中重复操作热水与原药材的质量比为2∶1-4∶1;HCl溶液加入量为4-6倍残渣质量。
步骤(2)中洗脱剂为去离子水洗脱体积为3-6柱体积,洗脱速度为0.8-4BV/h。
步骤(2)中氨水浓度为0.5-5mol/L.,洗脱至无氨基酸反应为止。
综上所述,本发明具有条件温和、多糖损失少、氨基酸活性高、工序少,制备量大,适用于医药、食品等领域。
具体实施方式:
下面结合实施例对本发明做进一步的说明。
实施例1:
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