[发明专利]一种产洛伐他汀真菌及其在普洱茶生产中的应用

说明书

技术领域：

本发明涉及一种产洛伐他汀真菌及其在普洱茶生产中的应用，属生物技术领域。 

背景技术：

近年来，普洱茶由于其良好的降脂功效和独特品质而受到广泛关注，且有多位学者报道在普洱茶中发现了洛伐他汀，他汀药物是羟甲戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂，是最为经典和有效的降脂药物，广泛应用于高脂血症的治疗，但目前还未有关于洛伐他汀和普洱茶中微生物的系统研究，也尚未有产洛伐他汀菌株应用在普洱发酵中的研究。 

利用红曲霉菌生产红曲米和红曲色素的生产和应用已有上千年的历史，其用途也由医用领域逐渐扩展到食品领域。红曲霉在发酵过程称产生的次级代谢产物洛伐他汀做为良好的天然降脂药成为研究与生产的热点，天然红曲中的洛伐他汀多为酸式，其空间结构与体内HMG-CoA更为接近，无需水解，直接发挥抑制体内胆固醇合成的作用，其活性较内酯式高约一倍，福建、浙江一带已经开发出多种含有洛伐他汀的功能性荞麦红酒、饼干等保健食品。 

在普洱茶研究领域，由于长期缺乏学科的研究，尤其是从微生物的角度来进行普洱茶的研究。而如何通过对云南普洱茶加工中微生物的研究，控制普洱茶中洛伐他汀的含量尚未见公开的文献报道。 

发明内容：

本发明的目的是从微生物的角度对普洱茶进行研究，为生产企业提供生产含洛伐他汀普洱茶的有益菌株来源。本发明的另一目的是通过控制有益菌种在普洱茶生产中的比例，为促进云南普洱茶品质稳定和提高发挥作用。 

本发明的产洛伐他汀真菌，由生产菌株的分离、纯化、经薄层层析初筛、高效液相复筛工序后得到。生产菌株为产洛伐他汀紫色红曲菌霉(Monascus purpurevs) MPT13，保藏日期：2010年5月20日，保藏号：CCTCC M 2010123，保藏单位：中国典型培养物保藏中心，地址：武汉武汉大学。 

本发明的紫色红曲霉(Monascus purpurevs)的形态学特征为： 

培养7d，在PDA培养基上菌落直径达2.9cm，菌落稍隆起，有放射状沟纹，边缘整齐，气生菌丝稀少，基内菌丝发达，菌落颜色以桔红色为主，边缘为浅肉色；菌落背面有放射状沟纹，边缘整齐，颜色以深桔红色为主，边缘桔黄色。在麦芽汁培养基上菌落直径达2.5cm，菌落稍隆起，有放射状深沟纹，边缘整齐，气生菌丝非常稀少，基内菌丝发达，菌落边缘凹陷，菌落表面有皮膜状，菌落颜色由里到外从土色变成桔红色；菌落背面有放射状沟纹，有呈开裂状，边缘整齐，颜色呈土色。在察氏培养基菌株生长弱，菌落平，直径为1.2cm，边缘不整齐，界限不清，气生菌丝稀疏，基内菌丝生长弱，菌落颜色呈淡桔红色；菌落背面颜色呈淡桔红色，边缘界限不清。本发明经公知的初筛、复筛、天然培养基培养、根霉纯化培养等传统工序后得到。 

显微形态为菌丝不规则地分枝、有隔膜，内有油滴，壁上附有许多颗粒，直径为2.9～9.2μm。分生孢子单生或成链，球形或倒梨形，6.6～9.2×7.9～13.1μm。闭囊壳无孔口，球形或稍椭圆形，直径20.4～71.4μm，呈桔红色或稍浅红色。子囊孢子卵形或椭圆形，3.9～5.3×4.7～6.6μm。 

红曲霉所产生的大量酶类和色素对普洱茶品质形成有着重要作用，接种产洛伐他汀菌株(紫色红曲霉Monascus purpurevs)MPT13发酵的普洱，在保持传统普洱茶品风味的基础上，香气和汤色方面也具有新的特点。 

本发明的产洛伐他汀的真菌应用于普洱茶的生产中。 

本发明的优点在于：将紫色红曲霉(Monascus purpurevs)按一定的比例接种应用到普洱茶发酵过程中，得到了含洛伐他汀的普洱茶且在保持传统普洱茶风味的基础上，香气和汤色方面也具有新的特点，并且缩短了加工时间，对普洱茶新产品与特色普洱茶的开发发挥重要作用。 

具体实施方式：

实施例1：紫色红曲霉(Monascus purpurevs)菌种的分离纯化 

从采集到的样品中，通过PDA培养基(200g马铃薯洗净去皮切块，加水1000mL煮半小时，纱布过滤，再加20g葡萄糖和18g琼脂，121℃灭菌30分钟后倒平板)和麦芽汁培养基(麦芽汁750～800ml，加水至1000mL，加15～18g琼脂，121℃灭菌30分钟后倒平板)分离纯化。 

分离纯化方法如下： 

(1)将固体培养基熔化，冷却至45℃，注入无菌培养皿中，每皿约15～20毫升，稍微摇转，静置，使成平板备用。