[发明专利]一种应用于猪、鸡养殖的制剂

说明书

技术领域

本发明涉及一种应用于猪、鸡养殖的制剂，具体是由粘膜乳杆菌制成的制剂在促进猪、鸡的生长，防治猪、鸡疾病或提高饲料转化率中的应用。

背景技术

2006年底在全国爆发的大菱鲆药残事件给我们敲响了警钟。欧盟已于2006年全面禁止抗菌药作为饲料添加剂在动物养殖中的应用。为保证食品安全，美国等发达国家对肉类、海产品等抗菌药残留进行检测。随着中国加入世贸组织，名优产品出口被普遍看好。但由于国内养殖不科学使用抗生素等有害药物的现象严重，大大限制了产品的出口。抗菌药替代产品是猪和鸡养殖业中迫切需要的。

发明内容

本发明的目的是提供一种促进猪、鸡的生长，防治猪、鸡疾病或提高饲料转化率的制剂，该制剂由粘膜乳杆菌制成。

本发明的制剂的制备优选是通过下述步骤实施的，但不局限于此制备工艺，公知的能实现的制备工艺均可以：采取可能含粘膜乳杆菌的样本，然后将样品置于灭菌厌氧瓶内，吹入氮气同时充分混合，迅速从中取一定量的样品加入18mL灭菌的稀释液中，吹入氮气同时充分混匀，在无菌操作台内，进行10^-1、10^-2、10^-3、10^-4，10^-5，10^-6，10^-7梯度稀释，取10^-5，10^-6，10^-7三个稀释梯度，分别涂布于粘膜乳杆菌选择性单菌落分离固体培养基上，置于厌氧罐内，厌氧37℃下培养48小时，选择长势良好的单菌落分别接种于液体扩增培养基中，置于厌氧罐内，厌氧37℃下扩增培养48小时。将所得培养液离心(12000rpm)分离出菌体后，将菌体冷冻真空干燥，调制出干燥菌粉，然后根据《伯杰细菌鉴定手册》、相关细菌鉴定文献或16S rRNA序列对比分析进行粘膜乳杆菌鉴定和毒性试验，将无毒性的粘膜乳杆菌干燥菌粉按需要比例添加辅料制成片剂、胶囊、散剂、粉剂或液体制剂等各种剂型，或制成兽药和饲料添加剂，也可加入其他活菌或低聚果糖等低聚糖起到协同作用。

粘膜乳杆菌选择性单菌落分离固体培养基优选但不局限于：纯化水1000mL，胰蛋白胨10g，酵母浸膏5g，三水醋酸钠晶体5g，檬酸三铵2g，MgSO₄.7H₂O 0.2g，琼脂15g，肉浸膏10g，葡萄糖20g，吐温-80 1mL，磷酸氢二钾2g，MnSO₄.2H₂O 0.05g。调pH6.2-6.3，121℃高压灭菌15min。

粘膜乳杆菌液体扩增培养基优选但不局限于：纯化水1000mL，胰蛋白胨10g，酵母浸膏5g，三水醋酸钠晶体5g，檬酸三铵2g，MgSO₄.7H₂O 0.2g，肉浸膏10g，葡萄糖20g，吐温-80 1mL，磷酸氢二钾2g，MnSO₄.2H₂O 0.05g。调pH6.2-6.3，121℃高压灭菌15min。

为进一步具体说明本发明，发明人利用上述方法通过粘膜乳杆菌选择性单菌落分离固体培养基分离鉴定出了无毒性的粘膜乳杆菌，本发明所述粘膜乳杆菌并不局限于为说明本发明所述的菌株，只要无毒性的粘膜乳杆菌均是本发明所述，均在本发明的保护范围内。

本发明所述粘膜乳杆菌优选但不限于粘膜乳杆菌DH103保藏编号CGMCC3766、粘膜乳杆菌DH105保藏编号CGMCC3765或粘膜乳杆菌DH106保藏编号CGMCC3763。

本发明实施说明中优选使用的粘膜乳杆菌的细菌学性质：

1、为说明本发明，本发明利用上述方法分离的粘膜乳杆菌分别为粘膜乳杆菌DH103保藏编号CGMCC3766、粘膜乳杆菌DH105保藏编号CGMCC3765或粘膜乳杆菌DH106保藏编号CGMCC3763。

2、菌落形态

显微镜观察：杆菌，革兰氏染色阳性。

平板形态：菌落呈乳白色、表面光滑、圆润、凸出于培养基表面、大小1-2mm。

3、生理生化鉴定

明胶液化：-；过氧化氢酶：-；硫化氢：-；硝酸盐还原：-；是否需氧：厌氧性。

4、糖酵解实验鉴定