[发明专利]蛋白酶激活受体激动剂的制备方法及其用途

权利要求书

1.一种蛋白酶激活受体激动剂的制备方法，其特征在于包括：1)该激动剂是两栖类物种大蹼铃蟾的三叶因子Bm-TFF2、人三叶因子2；2)利用PCR技术获取所需的Bm-TFF2或人三叶因子2基因全序列并将它们分别插入原核表达载体pET-32a(+)中；3)在大肠杆菌原核表达系统中高效表达了Bm-TFF2以及人三叶因子2；4)通过对表达菌株裂解液亲和层析得到可溶性融合蛋白TRX-Bm-TFF2以及人三叶因子2；5)融合蛋白经第X因子蛋白酶酶切后再经镍亲和柱纯化，得到纯化的Bm-TFF2以及人三叶因子2。

2.一种蛋白酶激活受体激动剂的用途，其特征在于：蛋白酶激活受体激动剂Bm-TFF2作为蛋白酶激活受体1、蛋白酶激活受体2和蛋白酶激活受体4的激动剂在蛋白酶激活受体检测试剂和制药中的应用。

3.一种蛋白酶激活受体激动剂的用途，其特征在于：所述的蛋白酶激活受体4作为胃癌检验诊断标志物在临床诊断试剂中的应用。

4.一种蛋白酶激活受体激动剂的用途，其特征在于：所述蛋白酶激活受体激动剂中的人三叶因子2作为蛋白酶激活受体4的激动剂在细胞迁移及创伤修复中的应用。

5.一种蛋白酶激活受体激动剂的用途，其特征在于：所述蛋白酶激活受体激动剂中的人三叶因子蛋白2和蛋白酶激活受体4作为临床肠癌检验诊断标志物在临床诊断试剂中的应用。

6.如权利要求2、3、4或5所述的蛋白酶激活受体激动剂的用途，其特征在于：所述的Bm-TFF2和哺乳类三叶因子2的衍生序列，其结构如下所示：

Seq Nol.Gly Phe Pro Ile Tyr Glu

Seq No2.Ser Phe Ile Ser Ala Arg Arg Asn

Seq No3.Ser Phe Lys Leu Lys Glu

Seq No4.Ser Phe Lys Pro Gln Glu

Seq No5.Gly Phe Pro Gly Ile Thr

Seq No6.Gly Tyr Pro Gly Ile Ser

Seq No7.Gly Phe Pro Gly Val Thr

Seq No8.Gly Tyr Pro His Val Thr。

7.根据权利要求6所述的蛋白酶激活受体激动剂的用途，其特征在于：所述的Bm-TFF2和哺乳类三叶因子2的衍生序列作为蛋白酶激活受体的新型配体，在生物医学试剂制备和制药中的应用。