[发明专利]培育抗细菌性条斑病转基因植物方法及其专用载体

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域中的一种培育抗细菌性条斑病转基因植物方法及其专用载体。

背景技术

水稻细菌性条斑病简称细条病，病原菌为水稻细菌性条斑病菌(Xanthomonasoryzae pv.oryzicola(Fang)Swings et al)。广泛分布于亚洲热带和亚热带地，国内主要分布于华南、华中、西南等地区。该病发生时，蔓延迅速，导致稻叶变黄枯死、空/秕粒增多、产量下降，严重时减产可达40％-60％。由于近年来感病的杂交水稻大面积推广，稻种的南繁和调运致使此病迅速蔓延，病区不断扩大，现已成为水稻主要病害。因此研究植物的细条病抗性的机理具有重要应用价值。在植物的抗病性应答中，基因表达调控起着重要的作用。通过调控特异基因的表达，植物可以迅速完成抗病应答，抵御病原菌的入侵，提高植物的抗病性。

调控病害应答基因表达是植物抵御外界病源物入侵的重要途径。在病源物入侵时，植物可以通过特异抗病基因的表达，低于外界病源物入侵，提高植物的抗病性。

因此，培育抗细菌性条斑病植物为研究热点。

发明内容

本发明的目的是提供一种培育抗细菌性条斑病转基因植物方法及其专用载体。

本发明提供的培育抗细菌性条斑病的方法，为将JERF1蛋白的编码基因导入目的植物获得转基因植物；所述转基因植物的细菌性条斑病抗性高于所述目的植物；

所述JERF1蛋白的氨基酸序列为序列表中的序列2。

上述序列2由372个氨基酸残基组成。

所述JERF1蛋白的编码基因为序列表中的序列1的自5’末端第87位到第1205位核苷酸。

其中序列1由1391个核苷酸组成，其开放阅读框为自5’末端第87位到第1205位，开放阅读框编码JERF1蛋白。

所述目的植物可为双子叶植物或者单子叶植物，优选为单子叶植物，尤其优选为水稻。

所述细菌性条斑病可由下述致病菌引起：水稻细菌性条斑病菌(Xanthomonasoryzae pv.oryzicola(Fang)Swings et al)。

所述JERF1蛋白的编码基因通过下述植物表达载体导入所述目的植物。

所述植物表达载体的启动子可为花椰菜花叶病毒35S启动子。

所述植物表达载体具体为将所述JERF1蛋白的编码基因插入载体pCAMBIA1200的ACSI和SpeI的识别位点间。载体pCAMBIA1200上有ADH1内含子，该内含子位于ACSI识别位点的上游。

所述抗细菌性条斑病的转基因植物中病程应答基因的表达率高于所述目的植物。

所述病程应答基因为OsChin和OsXal。

本发明的研究结果表明，转JERF1水稻的细菌性条斑病抗性高于野生型水稻，具体表型为，在受病原菌侵染后，转JERF1水稻的病斑长度明显短于野生型水稻。经过检测抗病基因表达，结果发现，与野生型水稻相比，转JERF1水稻中抗病基因的表达显著提高。因此本发明提供的转JERF1水稻的细条病抗性具有广阔的应用前景。

附图说明

图1为JERF1植物表达载体构建示意图

图2为野生型和转基因水稻接种细条病21天后的发病情况

图3为野生型和转基因水稻抗病基因表达的检测

具体实施方式

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。

下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

实施例1 转JERF1水稻的培育

1、重组菌的构建