[发明专利]表达猪源Cre重组酶载体pCEP4-Cre的构建无效
| 申请号： | 201010185086.1 | 申请日： | 2010-05-28 |
| 公开（公告）号： | CN101892257A | 公开（公告）日： | 2010-11-24 |
| 发明（设计）人： | 逄大欣;周杨;欧阳红生;朱建国;张明军;王铁东;李莉;聂代邦;段新平;毛丹 | 申请（专利权）人： | 吉林大学 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63 |
| 代理公司： | 吉林长春新纪元专利代理有限责任公司 22100 | 代理人： | 王薇 |
| 地址： | 130062 吉林省长春市*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 表达 cre 重组 载体 pcep4 构建 | ||
【权利要求书】：
1.一种表达猪源Cre重组酶载体pCEP4-Cre的序列SEO ID NO：1。
2.一种表达猪源Cre重组酶载体pCEP4-Cre的构建，其特征在于：首先采用基因工程的方法构建pCEP4-Cre质粒，并用载体pCEP4-Cre与载体pEF-stop-eGFP共转染进入细胞，在表达Cre重组酶的情况下，将转入到细胞中的载体pEF-stop-eGFP中的Loxp卯定的终止子删除，使后接的报告基因eGFP得以表达，从而用于剪切条件性表达绿色荧光蛋白载体中的LoxP元件；具体制备方法如下：
将LoxP锚定neo和一个终止序列基因，后接EF1α启动子启动的绿色荧光蛋白基因，当与pCEP4-Cre质粒转入细胞后，Cre重组酶表达，将Loxp卯定的终止子删除，使绿色荧光蛋白表达；
3.根据权利要求2所述的一种表达猪源Cre重组酶载体pCEP4-Cre的构建，其特征在于pCEP4-Cre载体在动物细胞中，能够游离于细胞染色体外，不整和到细胞基因组中，同时该载体表达的Cre重组酶能够切除动物细胞的基因组中或基因组外的loxp元件。
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