[发明专利]一种利用固定化酶制备栀子红色素的方法

权利要求书

1.一种利用固定化酶制备栀子红色素的方法，其特征在于：以京尼平苷为原料，通过碱解、酸化、加入固定化酶进行酶解，过滤得酶解液，然后加入伯氨基化合物反应，过滤得栀子红色素溶液；栀子红色素溶液通过酸沉淀，沉淀洗涤中和、脱水、干燥，即得到栀子红色素。

2.根据权利要求1所述的利用固定化酶制备栀子红色素的方法，其特征在于：所述方法的具体步骤如下：

（1）   固定化酶的制备

高分子化合物载体加水配制成20g/L～80g/L浓度的溶液，在温度为30℃～55℃条件下，搅拌，使其溶解；然后加入与高分子化合物载体质量比为1：1～1：20的酶，搅拌均匀，置于30℃～55℃的恒温摇床上，振荡0.5h～2h；将上述混合液逐滴滴入0.2mol/L～3.0mol/L的氯化钙溶液中，在3℃～5℃条件下静置30min～150min，使其凝聚固化，收集凝胶小球，并用0.08mol/L～0.3mol/L的氯化钠溶液洗涤，抽滤除去游离水分，收集得到的凝胶小球即为固定化酶；

  （2）栀子红色素的制备

①原料：以京尼平苷为原料；

②碱解：加入2～10倍京尼平苷质量（W/V）的0.5mol/L～5.0mol/L的碱溶液，反应温度控制在20℃～90℃，反应时间为1h～12h；

③酸化：碱解结束后，用1mol/L～6mol/L的可食用酸溶液调节溶液至pH4.0～pH6.0，得到酸化液，

④酶解：向步骤③得到的酸化液中加入步骤（1）制备的固定化酶进行酶解，固定化酶与酸化液的质量比为1：1～1：50，酶解条件为40℃～70℃，pH4.0～pH6.0，酶解时间为4h～20h；

⑤过滤分离：将步骤④酶解处理后的反应液过滤，得到滤液即为酶解液，同时回收固定化酶；

⑥与伯氨基化合物反应：向步骤⑤得到的酶解液中加入伯氨基化合物，伯氨基化合物与酶解液的质量比为1：5～1：25，反应温度为40℃～90℃，反应时间为2h～96h；

⑦过滤：将步骤⑥反应液过滤，得到栀子红色素溶液；

⑧酸沉淀：向步骤⑦所得的栀子红色素溶液中加入酸溶液，调节溶液至pH1～pH3，使其沉淀，静置1h～24h后，收集沉淀物；

⑨洗涤、中和：将步骤⑧得到的沉淀物用水洗涤至pH5～pH6，用0.05mol/L～5.0mol/L的碱溶液溶解沉淀物，并调节至pH7～pH9，得到栀子红色素水溶液；

⑩干燥、粉碎：将步骤⑨得到的栀子红色素水溶液进行脱水、干燥处理，得到的干燥粉末即为所制备的栀子红色素。

3.根据权利要求2所述的利用固定化酶制备栀子红色素的方法，其特征在于：步骤（1）所述的高分子化合物载体为海藻酸钠，以及海藻酸钠与明胶、变性淀粉、果胶和环糊精中的一种或几种的混合物；

步骤（2）所述的碱解中的碱溶液为氢氧化钠溶液、氢氧化钾溶液、碳酸钠溶液和碳酸氢钠溶液中的一种或几种的混合物；

步骤（2）所述的酸化中的可食用酸溶液为柠檬酸溶液、酒石酸溶液、苹果酸溶液、醋酸溶液、碳酸溶液、乳酸溶液、磷酸溶液和已二酸溶液中的一种或几种的混合物；

步骤（2）所述的与伯氨基化合物反应中的氨基化合物为氨基酸、蛋白质和氨基糖中的一种或几种的混合物；

步骤（2）所述的酸沉淀中的酸溶液为盐酸、硫酸、醋酸、柠檬酸、磷酸和乳酸中的一种或几种的混合物；

步骤（2）所述的洗涤、中和所用的碱溶液为氢氧化钠溶液、氢氧化钾溶液、碳酸钠溶液、碳酸钾溶液、碳酸氢钠溶液、碳酸氢钾溶液和碳酸氢铵溶液中的一种或几种的混合物。

4.根据权利要求2所述的一种利用固定化酶制备栀子红色素的方法，其特征在于：步骤（1）所述的酶为纤维素酶、果胶酶和β-葡糖苷酶中的一种或几种的混合物。

5.根据权利要求2所述的一种利用固定化酶制备栀子红色素的方法，其特征在于：步骤（2）所述的酶解过程为在反应器中进行的搅拌酶解，或是将固定化酶装入填充柱中，再将酸化液泵入填充柱进行的循环酶解。