[发明专利]高分子量多环芳烃降解菌株及其混合菌系

说明书

技术领域

本发明属于环境污染物生物处理技术领域，具体涉及高分子量多环芳烃降解菌株及其混合菌系，本发明还涉及该些菌株以及其混合菌系的应用。 

背景技术

多环芳烃(PAHs)是一种由两个或两个以上的苯环以线状、角状和簇状排列的稠环型化合物。由于多环芳烃具有毒性、生物蓄积性和半挥发性，并能在环境中持久存在，被列入典型持久性有机污染物(POPs)，受到国际上科学界的广泛关注。PAHs在其生成、迁移、转化和降解过程中，通过呼吸道、皮肤、消化道进入人体，极大地威胁着人类的健康。微生物降解被认为是PAHs污染土壤修复的重要途径，具有成本低、效率高、不易造成二次污染等优点。但PAHs随着分子量的增加，其水溶性急剧减小，毒性也越来越高，研究发现苯环数量越多越难被微生物所降解利用。从受污染的地区土壤中筛选分离出PAHs的降解优势菌株，再将其投回到污染环境，是进行修复多环芳烃污染土壤的关键环节。 

近几年随着城市化进程发展迅速，许多城市的发展极为迅速，原先位于郊区的一些化工类企业周围都逐渐成为人口聚集的市区，例如北京市在最近几年将五环内的工业企业都进行了搬迁，这些工业用地都将进行二次开发转变为居住、商业或娱乐用地，但由于其过去生产过程中的废水、废渣及化学品的影响，其厂区或附近区域的土壤受到了严重的污染，在开发过程或开发后带来了一系列环境和健康风险问题，因此，有必要对其污染进行必要的评估和修复。调查研究发现，焦化煤气、有机化工、石油工业、炼钢炼铁等工业所排放的废弃物中有相当高浓度的多环芳烃，其中焦化厂是多环芳烃污染排放最严重的一类企业。 

近年来，能够降解低分子量PAHs的微生物被大量报道，如假单胞菌属、分枝杆菌属、芽孢杆菌属等，但关于高分子量PAHs降解菌的报道还相对较少。事实上，环境中PAHs通常以多种组分同时存在，呈现为复合污染现象，其中包含大量难降解的高分子量PAHs，因此，筛选能同时降解多种高分子量PAHs的微生物具有十分重要的现实意义。 

发明内容

本发明的目的是针对上述现有的降解高分子量多环芳烃存在的难题，提供一种高效的降解菌系及其应用，主要是在土壤或废水的生物处理和环境污染修复中用于降解高分子量多环芳烃的应用。 

本发明所提供的降解菌系从受多环芳烃污染的土壤中经过人工富集培养、分离纯化得到，来源于北京焦化厂厂区内受多环芳烃污染的土壤。 

该混合菌系包括四株不同种属的纯菌Methylobacterium sp.lxb-3、Burkholderia sp.lxb-5、Rhodococcus sp.lxb-6、Phyllobacterium sp.lxb-9。 

其中，Methylobacterium sp.lxb-3为甲基杆菌属，在牛肉膏蛋白胨平板上菌落较小，呈淡粉色，表面光滑不透明，边缘整齐；其16S rDNA的GenBank登录号为GQ249213，序列如SEQ ID NO：1所示；该菌株于2010年4月8日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区大屯路，中国科学院微生物研究所，邮编：100101)保藏，编号为CGMCCNo.3713，其分类学命名为甲基杆菌(Methylobacterium sp.)。 

Burkholderia sp.lxb-5为伯克霍尔德氏菌属，在牛肉膏蛋白胨平板上菌落呈白色，半透明，边缘不整齐，不易挑取；其16S rDNA的GenBank登录号为GQ249215，序列如SEQ ID NO：2所示；该菌株于2010年4月8日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，编号为CGMCC No.3714，其分类学命名为伯克霍尔德氏菌(Burkholderia sp.)。 

Rhodococcus sp.lxb-6为红球菌属，在牛肉膏蛋白胨平板上菌落呈红色，边缘整齐，菌落较大，湿润；其16S rDNA的GenBank登录号为GQ249216，序列如SEQ ID NO：3所示；该菌株于2010年4月8日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，编号为CGMCC No.3715，其分类学命 名为红球菌(Rhodococcus sp.)。