[发明专利]活化蛋白激酶C受体1作为抗肿瘤耐药靶点的用途

说明书

技术领域

本发明属于分子生物学和肿瘤防治领域，更具体而言，本发明涉及预测、诊断和治疗肿瘤耐药性领域。本发明中提供了一种新的肿瘤耐药标志物：在肿瘤组织中高表达并导致肿瘤耐药的活化蛋白激酶C受体1(receptor for activated C-kinase 1，RACK1)，将该蛋白作为靶点，可设计出针对该蛋白及其相关分子的预测、诊断肿瘤耐药试剂盒、筛选针对该蛋白及其相关分子的治疗肿瘤耐药的药物。

背景技术

恶性肿瘤是危害人类健康的一类疾病，化疗是目前治疗恶性肿瘤的主要手段之一。然而，化疗过程中产生的肿瘤耐药，却成为影响肿瘤治疗效果的一大障碍。对肿瘤耐药发生机制的研究和寻找开发逆转耐药的药物是当前肿瘤防治中的重要研究领域。

为了逆转肿瘤耐药，提高化疗疗效，本领域迫切需要通过多种方式研究肿瘤耐药发生的机制、肿瘤耐药的关键基因靶点，并根据这些靶点设计治疗肿瘤耐药的新药，从而引导肿瘤耐药靶向性治疗。

RACK1(receptor for activated C-kinase 1，活化蛋白激酶C受体1)，最早被报道为PKCβII(蛋白激酶C的一种亚型)的受体，分子量约36kd。它含有7个内在的Trp-Asp(WD40)重复基序，是G蛋白β亚基的同源物(Mol Pharmacol2002；62：1261-1273)。RACK1的特殊结构使它能与多种激酶及膜受体相互作用，在细胞应答过程中发挥着重要的作用。质谱分析法发现RACK1能和核糖体的小亚基结合，并招募PKC到40S，从而调控翻译起始(Nat Struct Mol Biol2004；11：957-962)。另有文献报道，通过冷冻电镜观察到RACK1定位在核糖体40S亚基的头部区域，并能和核糖体RNA直接作用，同时，RACK1的一个WD序列被暴露，能够招募其它蛋白至核糖体(Mol Pharmacol 2002；62：1261-1273)。

发明内容

本发明的主要目的之一就是为了提供一种肿瘤耐药的关键基因靶点及蛋白靶点，为逆转肿瘤耐药、提高化疗疗效提供更为有效的工具。

本发明的另一个主要目的是根据这些靶点设计预测、诊断肿瘤耐药试剂盒、筛选针对该蛋白及其相关分子的治疗肿瘤耐药的药物。

本发明的目的之一是提供一种逆转肿瘤耐药的关键靶点RACK1，针对该靶点及其相关分子，如RACK1的配体PKC，设计药物和治疗方案，下调肿瘤中RACK1表达或抑制其功能，能够有效治疗耐药肿瘤。

在本发明的第一方面中，提供了一种活化蛋白激酶C的抑制剂或活化蛋白激酶C受体1的抑制剂在制备降低或消除肿瘤治疗中的耐药性的药物中的用途。

在本发明的一个实施方式中，所述活化蛋白激酶C或活化蛋白激酶C受体1来自人或其它真核生物，例如小鼠、大鼠、牛或猴等，且它们之间具有高度的保守性。

在本发明的一个实施方式中，所述抑制剂选自：抗活化蛋白激酶C或抗活化蛋白激酶C受体1的抗体、针对活化蛋白激酶C或活化蛋白激酶C受体1编码序列的RNA干扰分子或反义寡核苷酸。

在一个优选例中，所述抑制剂是抑制活化蛋白激酶C受体1结合到核糖体的抑制剂、或是抑制活化蛋白激酶C受体1与其配体结合抑制剂。

在另一个优选例中，所述活化蛋白激酶C的抑制剂选自：PKCβII的抑制剂CGP-53353或者PKC的抑制剂Go6976。

在本发明的另一个实施方式中，所述抑制剂是选自下组的RNA干扰分子：shRNA、siRNA、miRNA或dsRNA，更优选这些RNA干扰分子是针对活化蛋白激酶C受体1或其编码序列的核糖体定位序列的干扰分子。

在一个优选例中，所述RNA干扰分子选自：shRNA或siRNA，优选为针对活化蛋白激酶C受体1的shRNA，更优选所述shRNA的序列为：CTGACCAGGGATGAGACCA(SEQ ID NO：3)。

在本发明的另一个实施方式中，所述抑制剂作用于活化蛋白激酶C受体1或其编码序列的核糖体定位序列。

在一个优选例中，所述核糖体定位序列为R36/K38。

在本发明的另一个实施方式中，所述肿瘤选自：肝癌、乳腺癌、胶质瘤、结肠癌、子宫颈癌、肺癌(优选非小细胞肺癌)、胰腺癌、胃癌、或膀胱癌，优选肝癌、乳腺癌、胶质瘤和非小细胞肺癌，更优选肝癌。

在本发明的另一个实施方式中，所述肿瘤治疗所采用的治疗剂选自：烷化剂、抗代谢药、抗肿瘤抗生素、植物类抗癌药、激素、或免疫制剂。