[发明专利]一种肝素钠粗品的提取方法

说明书

技术领域

本发明属于医药制品的提取领域，具体涉及一种肝素钠粗品的提取方法。

背景技术

肝素及衍生物药物是经典的抗凝、抗血栓药物，临床应用已达70余年。随着人类平均寿命的延长、生活习惯和饮食结构的改变，血栓病等心脑血管疾病的发病率和死亡率逐年上升，已成为影响人类健康的首要因素，因此，抗血栓药物在世界范围内具有巨大的发展空间和市场前景，近年来，其市场容量迅速增长，2008年全球销售额为197.06亿美元，预计2012年销售额将达到291.98亿美元，年均复合增长率为10.33％。同时，肝素及衍生物药物的临床应用范围不断扩大，经大量临床实践证实其治疗多种疾病疗效显著，除主要用于治疗血栓性疾病外，还可以用于治疗心绞痛、高脂血症、肝炎、类风湿性关节炎、肾小球肾炎、急性妊娠脂肪肝、重症肺心病、支气管哮喘、肺结核、肺炎等疾病，以及应用于器官移植、弥漫性血管内凝血、人工瓣膜替换术后、人工肾手术过程、血液透析等。另外，肝素衍生物药的新药开发一直在不断进行中，目前国际知名制药企业已开发出十几种以低分子肝素为代表的肝素衍生物药物，如依诺肝素钠、达肝素钠、那曲肝素钙、亭扎肝素钠、舍托肝素钠、瑞肝素钠等。基于以上原因，近年来，全球肝素及衍生物药物的市场需求呈高速增长态势。

在全球范围内，肝素原料资源主要分布在中国、美国和欧盟地区：欧美地区的肝素原料资源有限且已接近被完全利用，肝素粗品产量趋于稳定：我国拥有世界上最丰富的肝素原料资源，而且随着生猪养殖和屠宰集约化规模的扩大，肝素粗品的产量仍有较大的提升空间。因此长期以来，欧美制药企业从我国大量进口肝素粗品作为原料生产肝素原料药。但是由于我国生猪养殖和屠宰集约化程度低，肝素粗品质量千差万别，欧美地区的肝素提取工艺不适应我国肝素粗品的质量特点，导致肝素收率低，以及原料浪费和成本上升。因此，如何提供一种高效、稳定、节约、产品收率和纯度高，易于规模化生产的提取肝素粗品的方法是目前急待解决的问题。

发明内容

本发明的目的就是提供了一种高效、稳定、节约、产品收率和纯度高，易于规模化生产的提取肝素钠粗品的方法。

本发明的目的是通过以下方式实现的。

一种肝素钠粗品的提取方法，包括以下步骤：

1)盐溶、碱化及酶解

将猪的原肠刮出的肠皮，黏膜混合物放入酶解罐中，混合均匀并搅拌，用固体盐或盐水调整盐度到3.0-5.0；用NaoH溶液调pH值至8.5-9.5，缓慢升温至40-45℃，按每6Kg肠皮，黏膜混合物加入1.5-4.0g的碱性蛋白酶；所述的碱性蛋白酶粉预先用冷水溶解搅拌成糊状；将反应物搅拌升温至50-55℃；保温2-3小时，并调整pH值为8.2-8.5；保温结束后，迅速将罐温升到80-90℃，静止保温十分钟，得到酶解液；

2)过滤、吸附

将步骤1)得到的酶解液用60幕尼龙滤网过滤至吸附罐内，冷却至50-60℃；按每6Kg肠皮，黏膜混合物加10-25g的树脂，搅拌吸附8-10小时；用过滤器将树脂与吸附废液分离；用清水将吸附好的树脂洗至中性，并用60℃热水浸泡去油脂后放入树脂洗脱罐中；

3)洗脱、沉淀

用食用盐与自来水配制成饱和盐水；按1∶1的比例将饱和盐水加入树脂洗脱罐中，第一次洗脱4小时，第二次洗脱3小时；将第一、二次洗脱的盐水与肝素钠混合体打入沉淀罐内搅拌均匀；将80％的食用酒精加入沉淀罐并搅拌，兑成酒精度为35％；沉淀24小时至清；吸去酒精回收重新循环利用，沉淀物即为肝素钠粗品；

4)干燥

将步骤3)得到的肝素钠粗品用95％酒精脱水，滤干，恒温70℃烘干，粉碎即可。

本发明创新性主要体现在以下几个方面：

1)理论创新：

本发明产品“肝素钠”系自猪的肠黏膜中提取的硫酸氨基葡聚糖的钠盐，属黏多糖类物质，是粘多糖硫酸酯类抗凝血药。它是糖醛酸和葡萄糖胺以1-4键结合的重复的二糖单位的多糖链混合物，其中含10到30个二糖单元不等，一般分子量在4000-120000道尔顿范围之内，其化学分子结构式为：

2)技术创新：

a、本发明整个生产过程易于实行自动化流水线作业，大量节约了人力资源，同时提高了生产效率，保证了产品质量和纯度，实现了效益最大化。

b、本发明生产产品过程是将原料通过酶解液在一定温度下酶解成液态，从而使产品的收集率更高并且无任何残渣，永远告别了一锅煮的时代，再也不用为打捞大量粘乎乎的残渣费心了。

c、通过变化投入原料及酶解液浓度的比例，可以实现对产品纯度的控制，一般控制范围在50％-150％。