[发明专利]羧基化聚苯乙烯微球与C反应蛋白抗体的共价交联法

权利要求书

1.一种羧基化聚苯乙烯微球与C反应蛋白抗体的共价交联法，其特征是包括以下步骤：

(1)根据需要选择合适粒径的羧基化聚苯乙烯微球；

(2)将羧基化聚苯乙烯微球用缓冲液离心清洗，重悬浮；

(3)加入交联剂后混匀，温育后离心清洗；

(4)加入酸碱调节剂后加入C反应蛋白抗体和封闭剂，温育；

(5)清洗羧基化聚苯乙烯微球；

(6)加入缓冲液，重悬浮，储存于缓冲液中。

2.根据权利要求1所述羧基化聚苯乙烯微球与C反应蛋白抗体的共价交联法，其特征是步骤(1)所述羧基化聚苯乙烯微球的粒径为50～300nm。

3.根据权利要求1所述羧基化聚苯乙烯微球与C反应蛋白抗体的共价交联法，其特征是步骤(2)所述缓冲液是醋酸盐缓冲液或磷酸盐缓冲液，缓冲液的离子浓度为20～80mM，PH值为7.5～8。

4.根据权利要求1、2或3所述羧基化聚苯乙烯微球与C反应蛋白抗体的共价交联法，其特征是步骤(3)所述交联剂包括碳二亚胺类，步骤(3)完成后交联剂的浓度为1～20mg/mL，所述温育的温度为15～45℃，时间为15～60分钟。

5.根据权利要求1、2或3所述羧基化聚苯乙烯微球与C反应蛋白抗体的共价交联法，其特征是步骤(4)所述酸碱调节剂为2至6个C原子的有机酸，包括乙酸。

6.根据权利要求4所述羧基化聚苯乙烯微球与C反应蛋白抗体的共价交联法，其特征是步骤(4)所述酸碱调节剂为2至6个C原子的有机酸，包括乙酸。

7.根据权利要求1、2或3所述羧基化聚苯乙烯微球与C反应蛋白抗体的共价交联法，其特征是步骤(4)所述封闭剂为非离子型表面活性剂，包括曲拉通X-100、吐温80。

8.根据权利要求4所述羧基化聚苯乙烯微球与C反应蛋白抗体的共价交联法，其特征是步骤(4)所述封闭剂为非离子型表面活性剂，包括曲拉通X-100、吐温80。

9.根据权利要求5所述羧基化聚苯乙烯微球与C反应蛋白抗体的共价交联法，其特征是步骤(4)所述封闭剂为非离子型表面活性剂，包括曲拉通X-100、吐温80。

10.根据权利要求6所述羧基化聚苯乙烯微球与C反应蛋白抗体的共价交联法，其特征是步骤(4)所述封闭剂为非离子型表面活性剂，包括曲拉通X-100、吐温80。

11.根据权利要求10所述羧基化聚苯乙烯微球与C反应蛋白抗体的共价交联法，其特征是步骤(4)所述温育的温度为15～45℃，时间为1.5～20小时。

12.根据权利要求1、2或3所述羧基化聚苯乙烯微球与C反应蛋白抗体的共价交联法，其特征是步骤(6)所述缓冲液为非离子两性缓冲液，包括羟乙基哌嗪乙硫磺酸、2-(N-吗啡啉)乙磺酸，所述缓冲液离子浓度为20～100mM，PH值为4.5～8。

13.根据权利要求4所述羧基化聚苯乙烯微球与C反应蛋白抗体的共价交联法，其特征是步骤(6)所述缓冲液为非离子两性缓冲液，包括羟乙基哌嗪乙硫磺酸、2-(N-吗啡啉)乙磺酸，所述缓冲液离子浓度为20～100mM，PH值为4.5～8。

14.根据权利要求5所述羧基化聚苯乙烯微球与C反应蛋白抗体的共价交联法，其特征是步骤(6)所述缓冲液为非离子两性缓冲液，包括羟乙基哌嗪乙硫磺酸、2-(N-吗啡啉)乙磺酸，所述缓冲液离子浓度为20～100mM，PH值为4.5～8。

15.根据权利要求6所述羧基化聚苯乙烯微球与C反应蛋白抗体的共价交联法，其特征是步骤(6)所述缓冲液为非离子两性缓冲液，包括羟乙基哌嗪乙硫磺酸、2-(N-吗啡啉)乙磺酸，所述缓冲液离子浓度为20～100mM，PH值为4.5～8。

16.根据权利要求7所述羧基化聚苯乙烯微球与C反应蛋白抗体的共价交联法，其特征是步骤(6)所述缓冲液为非离子两性缓冲液，包括羟乙基哌嗪乙硫磺酸、2-(N-吗啡啉)乙磺酸，所述缓冲液离子浓度为20～100mM，PH值为4.5～8。