[发明专利]胶质芽孢杆菌PM13菌株低粘度、高产率的发酵生产方法

权利要求书

1.一种胶质芽孢杆菌PM13菌株低粘度、高产率的发酵生产方法，其具体过程为：

(1)菌种活化：将保存的胶质芽孢杆菌PM13菌种作为菌种，划线接种到斜面培养基中，在30℃～34℃的条件下于培养箱中培养24～120h；

(2)种子液制备：将步骤(1)得到的胶质芽孢杆菌PM13菌种接种到装有30～60mL液体种子培养基的250mL三角瓶中，在30～34℃、200～250r/min的条件下摇瓶培养12～24h；

(3)摇瓶培养：将步骤(2)获得种子液接种到液体发酵培养基中，进行摇瓶培养，培养工艺参数为：种子液接种量为1～10％，250mL三角瓶装液量为30～60mL，初始pH为7.0～8.0，发酵温度为32～36℃，摇床转速为200～250r/min，发酵时间为40～48h；

(4)发酵罐发酵：或将步骤(2)获得的种子液接种到液体发酵培养基中，用机械搅拌式发酵罐进行发酵，发酵工艺参数为：接种量3～10％，装液量60～80％，消泡剂添加量0.01％～0.06％，发酵温度32～36℃，搅拌速度200～700r/min，通气量0.6～1.0M³/h，罐压0.04～0.1MPa，溶氧30～100％，发酵pH值6.0～8.5，发酵时间35～48h。

2.根据权利要求1所述的生产方法，其特征是：斜面培养基用蒸馏水配制，其组成为蔗糖5g/L，石英砂1g/L，K₂HPO₄2g/L，FeCl₃0.005g/L，MgSO₄.7H₂O0.5g/L，CaCO₃0.5g/L，琼脂15～20g/L，pH值7.5。

3.根据权利要求1所述的生产方法，其特征是：液体种子培养基用蒸馏水配制，其组成为蔗糖5.0～15.0g/L，K₂HPO₄1.0～3.0g/L，MgSO₄.7H₂O 0.0～2.0g/L，NaCl 0.0～0.5g/L，CaCO₃1.0～5.0g/L，pH值7.0～8.0。

4.根据权利要求1所述的生产方法，其特征是：液体发酵培养基用蒸馏水配制，其组成为糖蜜3.0～5.0g/L，淀粉1.0～3.0g/L，豆粕粉5.0～10.0g/L，CaCO₃4.0～10.0g/L，K₂HPO₄1.0～3.0g/L，MgSO₄·7H₂O 1.0～3.0g/L，NaCl 0.0～0.5g/L，pH值7.0～8.0。

5.根据权利要求1所述的生产方法，其特征是：获得的胶质芽孢杆菌PM13菌株发酵液芽孢生成量为0.8～1.5×10⁹cfu/mL，发酵液稠度系数在0.5Pasⁿ以下，采用普通的机械搅拌式发酵罐进行发酵生产。