[发明专利]去细胞生物血管支架制备方法

权利要求书

1.去细胞生物血管支架制备方法，其特征在于包括去污剂单独去细胞生物血管支架制备方法和去污剂-蛋白酶联合去细胞生物血管支架制备方法，其中：

(1)去污剂单独去细胞生物血管支架制备方法包括下列步骤：

①无菌条件下，取新鲜或冻存的血管管状组织。

②用含有抗生素的生理盐水，或磷酸盐缓冲液洗去管腔内外的血液。

③结扎血管的一端，用注射器向管腔注入以磷酸盐缓冲液配制的浓度为1％的十二烷基硫酸钠和浓度为0.02％的叠氮化钠。

④结扎血管得另一端，将上述血管管状组织置于含有1％十二烷基硫酸钠+0.02％叠氮化钠的烧杯内。

⑤在烧杯内放入搅拌棒，将烧杯置于磁力搅拌器上，启动磁力搅拌器，调整转速为30转/分钟，室温下连续转动12小时。

⑥取出血管支架，拆除结扎线，用磷酸盐缓冲液或生理盐水冲洗整个管腔，洗去残留的十二烷基硫酸钠和叠氮化钠溶液。

⑦结扎血管的一端，用注射器向血管支架注入以磷酸盐缓冲液配制的浓度为0.3％的京尼平溶液，结扎支架另一端，将血管支架置于上述京尼平溶液内，4℃下固定4小时。

⑧取出血管支架，拆除结扎线，用磷酸盐缓冲液或生理盐水冲洗整个管腔，洗去残留的京尼平。

⑨经组织学检测合格后，冷冻干燥，环氧乙烷消毒后，储存于-20℃的冰箱内备用。

(2)去污剂-蛋白酶联合去细胞生物血管支架制备方法包括下列步骤：

①无菌条件下，取新鲜或冻存的血管管状组织。

②用含有抗生素的生理盐水或磷酸盐缓冲液洗去管腔内外的血液。

③结扎血管的一端，用注射器向管腔注入以磷酸盐缓冲液配制的浓度为0.25％的胰蛋白酶和0.02％的乙二胺四乙酸或其钠盐的消化液，结扎血管的另一端，无菌下，将其置于室温下消化30分钟。

④拆除结扎线，用磷酸盐缓冲液或生理盐水冲走血管内残留的消化液。

⑤将血管的两端与蠕动泵连接，蠕动泵的连接管内事先注入浓度为1％的十二烷基硫酸钠和浓度为0.02％的叠氮化钠。

⑥启动蠕动泵，调整转速为25-30转/分钟，持续灌流3小时。

⑦取出血管支架，用磷酸盐缓冲液或生理盐水冲洗整个管腔，洗去残留的十二烷基硫酸钠和叠氮化钠溶液。

⑧结扎血管的一端，用注射器向支架注入以磷酸盐缓冲液配制的浓度为0.3％的京尼平溶液，结扎支架另一端，将支架置于上述京尼平溶液内，4℃下固定4小时。

⑨取出血管支架，拆除结扎线，用磷酸盐缓冲液或生理盐水冲洗整个管腔，洗去残留的京尼平。

⑩经组织学检测合格后，冷冻干燥，环氧乙烷消毒后，储存在-20℃的冰箱内备用。

2.按权利要求1所述的去细胞生物血管支架制备方法，其特征在于所述的血管管状组织为脐血管、颈血管、腹主动脉或大隐静脉。